【摘 要】
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目的观察缓激肽后处理对全脑缺血缺氧损伤的改善作用,并探讨其可能机制。方法随机将40只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分为假手术组（sham组）、心脏骤停组（CA组）、缓激肽后处理组（BK组）、Compound C+缓激肽后处理组（CP+BK组）和雷帕霉素+缓激肽后处理组（Ra+BK组）,每组各8只。采用窒息法诱导大鼠心脏骤停前30min,CP+BK组大鼠腹腔注射Compound C
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目的观察缓激肽后处理对全脑缺血缺氧损伤的改善作用,并探讨其可能机制。方法随机将40只成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分为假手术组（sham组）、心脏骤停组（CA组）、缓激肽后处理组（BK组）、Compound C+缓激肽后处理组（CP+BK组）和雷帕霉素+缓激肽后处理组（Ra+BK组）,每组各8只。采用窒息法诱导大鼠心脏骤停前30min,CP+BK组大鼠腹腔注射Compound C（250ug/kg）,Ra+BK组大鼠腹腔注射雷帕霉素（1mg/kg）,余组大鼠经腹腔注射相同剂量的DMSO,ROSC后48h BK组、CP+BK组和Ra+BK组经腹腔注射缓激肽（150ug/kg）,余组经腹腔注射相同剂量的生理盐水。ROSC后72h用神经功能学评分（NDS）评价各组大鼠神经功能,后进行各组大鼠标本取材。免疫组化法检测AMPK-mTOR信号通路相关蛋白（AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR）及自噬相关蛋白（LC3、P62）表达、透射电镜观察不同组别自噬小体、TUNEL法检测各实验组海马神经细胞凋亡的情况。结果（1）与sham组相比:CA组神经功能学评分降低,LC3、P62、AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白表达量增多,凋亡细胞数量均增多;（2）与BK组相比:（1）CA组神经功能学评分降低,AMPK及p-AMPK蛋白表达量减少,mTOR及p-mTOR蛋白表达量增多,自噬相关蛋白LC3表达量减少、P62表达量增多,凋亡细胞数量增多;（2）CP+BK组神经功能学评分降低,AMPK及p-AMPK蛋白表达量减少,mTOR及p-mTOR蛋白表达量增多,自噬相关蛋白LC3表达量减少、P62表达量增多,凋亡细胞数量增多;（3）Ra+BK组神经功能学评分增高,AMPK及p-AMPK蛋白表达量增多,mTOR及p-mTOR蛋白表达量减少,LC3表达量增多,P62表达量减少,凋亡细胞数量减少。上述各组间差异结果均具有统计学意义（P<0.05）。（3）透射电镜结果:透射电镜观察各组自噬小体,sham组未见有自噬小体形成,余各组均可见自噬小体,同一倍镜下观察多个视野,相比较而言,Ra+BK组自噬小体数量最多,BK组次之,CA组和CP+BK组自噬小体数量未见明显差别。同一倍数、多个视野观察各组标本,相比较而言,Ra+BK组自噬小体数量最多,BK组次之,CA组和CP+BK组自噬小体数量未见明显差别。结论缓激肽后处理可以通过激活AMPK-mTOR通路介导的自噬,减少海马神经细胞凋亡,从而保护心肺复苏大鼠大脑神经元,减少神经元缺血再灌注损伤。
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