基于细胞焦亡机制探讨肾脑复元汤对缺糖缺氧PC12细胞的保护作用

来源 :湖南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:YNiit562552379
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本研究通过采用细胞培养、形态学检查及染色、生化检测和Western Blot等技术手段,观察肾脑复元汤(ShenNaoFuYuan decoction,SNFYD)含药血清对缺糖缺氧(Oxygen-Glucose Deprivation,OGD)PC12细胞的保护作用,及其对NLRP3/Caspase-1、IL-1β/IL18焦亡通路相关细胞因子表达的影响,并以此探讨肾脑复元汤通过抑制焦亡、减轻损伤以保护PC12细胞的可能机制,为其应用于缺血性中风治疗提供实验依据。方法:1、肾脑复元汤含药血清制备:取SD大鼠灌服肾脑复元汤,连续3天,采集腹主动脉血液,离心分离血清,灭活后冻存备用。2、PC12的培养与模型建立:PC12细胞株为购入成品,使用含10%FBS及1%双抗的DMEM-HG完全培养液进行培养,根据检测的指标与实验目的,予接种至相应孔板。种板后待细胞贴壁,对数生长时,予更换无糖培养液,并置于三气培养箱中,温度37℃,通以95%N2-5%CO2进行培养。OGD时间为4小时,再换回原培养条件,恢复糖、氧供应,并根据分组进行药物处理。3、肾脑复元汤含药血清培养液对PC12干预:OGD后的细胞设三组,SNFYD组为实验组,使用含10%肾脑复元汤含药血清的完全培养基进行培养;阴性对照组为空白血清组,使用10%空白大鼠血清加入完全培养基进行干预;阳性对照组选择NLRP3抑制剂INF39为干预药物,以1μM浓度加入完全培养基进行培养。4、检测相关数据:各组细胞于倒置显微镜下观察形态,AO/EB染色后荧光显微镜下检测凋亡程度,CCK8法检测活性、Western blot法检测焦亡通路NLRP3/Caspase-1—IL-1β/IL18细胞因子的表达情况。结果:OGD造模后,PC12损伤明显,焦亡通路的各细胞因子明显升高,使用肾脑复元汤含药血清及INF39干预受损的PC12细胞后,PC12细胞形态、活性均见好转,相应地NLRP3/Caspase-1焦亡通路激活减弱,表明该通路的抑制与细胞状态的好转有相关性,而肾脑复元汤与INF39均能抑制该通路的激活。提示肾脑复元汤可能通过抑制NLRP3/Caspase-1及下游焦亡通路,减少神经细胞炎性凋亡,从而保护神经组织,达到治疗脑梗塞的目的。结论:肾脑复元汤含药血清对缺氧缺糖PC12细胞模型有保护作用,这一作用可能与抑制焦亡有关,NLRP3/Caspase-1及下游的IL-18、IL-1β细胞因子可能是抑制焦亡的关键靶点。
其他文献
目的观察具有益气健脾化湿功效的参术调脾颗粒对糖尿病前期患者血糖、血脂、胰岛功能的影响,从而对糖尿病前期人群的逆转率的影响;同时从蛋白因子水平研究参术调脾颗粒对糖调
皮尔士的实用主义主要是一种意义理论,准确地说,是关于意义的语用学理论。皮尔士看来,实用主义首先是一种科学的逻辑定义方法,这种方法使我们获得关于概念最高等级清晰性的理
目的探究集束化护理干预对腹腔镜下胃癌根治术患者术后恢复及生活质量的影响。方法选取2017年1月至2019年5月该院行腹腔镜下胃癌根治术患者80例,根据是否行集束化护理干预将
【安泰科讯】2005年(特别是上半年)国际钒价大幅波动。其中,欧洲市场钒铁价格于去年4月中旬创记录地达到了123-128美元/千克钒,较年初上涨150%;4月下旬五氧化二钒价格也达到
一、有色金属资源的共享已经成为经济全球化的必然趋势1、世界有色金属勘查投资增长迅速,有色金属资源供需基本平衡上世纪90年代世界有色金属勘查受到世界有色
期刊
<正>今年5月26日,中国外汇交易中心旗下的中国货币网发布了一篇"答记者问",确认了市场从当天午间开始流传的关于在人民币中间价中加入"逆周期调节因子"的新闻。尽管"答记者问
为掌握淤泥质黏土的起动规律,采用水体灰度和水流速度同步测量的方法,对不同沉积密度条件下淤泥质黏土的起动特性进行了试验研究.试验结果表明:淤泥质黏土的起动现象可用弱起
随着经济的不断发展,我国进入知识经济时代,人力资本的作用日益突出,成为企业生存和发展的关键因素。与其他行业相比,建筑行业人员素质普遍较低,必须加强人力资源管理,重视人
水质污染对环境生态和居民健康的影响较大,其危害性也是最为直接。对此,很有必要采用科学的检测方法与先进的检测技术,从而提升水质检测结果的稳定性、准确性,同时,供水企业
<正>推行绿色信贷是我国经济社会可持续发展的必然要求。作为国家老工业基地的黑龙江省调整产业结构,节能减排,转变经济发展方式,任重而道远,而叫响绿色信贷更是当务之急。党