论文部分内容阅读
目的:观察慢性低O2高CO2对腺苷A2A受体基因敲除小鼠股外侧肌形态的影响，探讨慢性低O2高CO2对腺苷A2A受体基因敲除小鼠股外侧肌caveolin-3的影响。 方法:3月龄SPF级C57BL/6雄性小鼠，腺苷A2A受体基因敲除小鼠及其同胞的野生型小鼠各16只，各随机分为2组（每组8只）:腺苷A2A受体基因敲除对照组（KONC组），腺苷A2A受体基因敲除低氧高二氧化碳组（KOHH组）;野生型对照组（WTNC组），野生型低氧高二氧化碳组（WTHH组）。将WTHH组和KOHH组小鼠置于常压低氧高二氧化碳舱内，通入氮气(N2)调节舱内氧浓度维持在9％～11％，输入二氧化碳(CO2)使其舱内浓度维持在5％～6％，每天8小时，每周6天。WTNC组和KONC组小鼠除吸入空气外，其余条件同实验组。所有小鼠于实验开始和结束时各称取体重一次。4周后，小鼠用1％水合氯醛腹腔注射麻醉后处死，取小鼠左后肢股外侧肌，HE染色后光镜下观察肌纤维形态学改变、免疫荧光法检测肌肉caveolin-3蛋白表达，荧光显微镜下观察其荧光强度，右后肢股外侧肌RT-PCR法检测肌肉caveolin-3 PCR产物表达水平。 结果;1.与WTNC,KONC组比，WTHH和KOHH小鼠体重增长减慢(p＜0.01);2.光镜示:WTNC，KONC组骨骼肌形态正常，WTHH和KOHH肌纤维萎缩，KOHH组小鼠更明显。3.RT-PCR法示:与WTNC组相比，KONC组caveolin-3mRNA表达无明显变化，WTHH组、KOHH组降低，差异均有统计学意义（p＜0.01），KOHH组更明显。4.免疫荧光法示:与WTNC组相比，KONC组caveolin-3荧光强度无明显变化，WTHH组、KOHH组降低，KOHH组更明显。 结论:慢性低O2高CO2可导致小鼠骨骼肌纤维萎缩;慢性低O2高CO2引起caveolin-3表达降低，慢性低O2高CO2可能通过降低caveolin-3进而引起肌萎缩;敲除腺苷A孙受体小鼠在慢性低O。高CO2条件下，可使caveolin-3表达进一步降低，从而加重肌纤维损害;腺苷A2A受体基因敲除小鼠COPD模型可能是研究腺苷A2A受体在COPD骨骼肌功能障碍中与caveolin-3相关性较可靠工具之一。