食管鳞状细胞癌中缝隙连接蛋白26、32、43与E-钙黏蛋白的表达及其临床意义

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目的:研究缝隙连接蛋白26、32、43(connexin26、connexin32、connexin43,Cx26、Cx32、Cx43)与E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在食管鳞状细胞癌中的表达及其相关性,并探讨其在食管鳞状细胞癌中发生、发展中的临床意义。方法:1、应用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术在14例食管鳞状细胞癌及癌旁正常组织中对细胞缝隙连接相关的基因Cx26、Cx32、Cx43以及E-cad进行基因水平的检测。2、应用免疫组织化学染色技术从蛋白水平检测Cx26、Cx32、Cx43及E-cad在食管鳞状细胞癌及正常上皮组织中的表达情况,并分析其与食管鳞状细胞癌发生、发展、生物学行为及预后的关系。结果:1、应用RT–PCR技术对14例食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常组织中的目的基因进行扩增,Cx26mRNA、Cx32mRNA、Cx43mRNA和E-cadmRNA在正常粘膜,鳞癌组织均有阳性表达。在正常粘膜和鳞癌组织中,Cx26mRNA的相对表达量分别为0.8213,0.4023,两组之间相对表达量差异有统计学意义(P<0.01)。Cx32mRNA的相对表达量分别为0.8777,0.7626,两组之间相对表达量差异没有统计学意义(P>0.05)。Cx43mRNA的相对表达量分别为0.9006,0.7667,两组之间相对表达量差异没有统计学意义(P>0.05)。E-cadmRNA的相对表达量分别为1.0385,0.6890,两组之间相对表达量差异有统计学意义(P<0.01)。2、应用免疫组织化学染色技术检测Cx26、Cx32、Cx43及E-cad在蛋白水平的表达情况,在78例食管鳞癌组织、22例癌旁食管正常上皮组织、16例食管重度不典型增生/原位癌中,22例正常组织Cx26、Cx32、Cx43及E-cad蛋白均呈阳性表达,Cx26、Cx32、Cx43及E-cad蛋白在正常上皮组、不典型增生组和食管鳞癌组之间表达差异均有统计学意义(P<0.01),在食管正常上皮组织中的阳性表达率均显著高于癌组织(P<0.01),不典型增生组与食管鳞癌组之间表达差异均有统计学意义(P<0.01,),食管正常上皮组与不典型增生组之间表达差异均无统计学意义(P>0.05);Cx26、Cx32、Cx43表达程度与分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有一定关系(P<0.05),E-cad表达程度与分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床分期均有一定关系(P<0.05);Cx26、Cx32、Cx43分别与E-cad呈正相关关系性(r=0.771,P<0.01;r=0.595,P<0.01;r=0.661,P<0.01)。结论:1、Cx26mRNA,Cx32mRNA,Cx43mRNA和E-cadmRNA在食管正常上皮组织与食管鳞状细胞癌中均呈阳性表达,在食管鳞状细胞癌中Cx26mRNA和E-cadmRNA表达下调,而Cx32mRNA和Cx43mRNA表达无明显下调。2、Cx26、Cx32、Cx43及E-cad在食管正常上皮组织中均呈阳性表达,在食管鳞状细胞癌中表达均显著下调且表达量逐渐减弱甚至消失。3、Cx26、Cx32、Cx43表达程度与癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均有一定关系,可作为食管鳞状细胞癌浸润、转移、判断预后的重要标记4、E-cad表达程度与癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均有一定关系,可作为食管鳞状细胞癌临床进展的重要标记。5、Cx26、Cx32、Cx43分别与E-cad的表达具有正相关关系性,相互协调共同促进了食管鳞状细胞癌的浸润、转移,二者结合可作为判断食管鳞状细胞癌生物学行为的重要参考指标。
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