失眠严重降低人们的生活质量,并且失眠会引起多种精神性疾病,如抑郁、焦虑等。因此,对失眠患者治疗的研宄具有非常重要的意义。目前以GABAa受体为靶点的药物均有明显的副作用。因此开发一种没有副作用,治疗效果专一的药物非常必要。目前研究发现多种G蛋白偶联受体与睡眠相关。中药是我们防病、治病及养生保健的重要物质基础,几千年来,传统中医药为中华民族的繁衍昌盛做出了巨大的贡献,在中药中分离得到的天然产物一直是新药研发中先导化合物的主要来源。药理学实验证明多种中药具有明显的镇静安神作用,如酸枣仁、天麻、人参、夜交藤、石菖蒲等。但其镇静安神类成分及作用机制尚并不明确。我们前期研究发现夜交藤粗提物具有良好的镇静安神活性,因此,本研究利用实验室现有的多巴胺受体D2/D3分子探针对夜交藤中活性成分进行追踪分离,寻找活性单体。本实验主要研究结果如下:(1)对实验室现有的多巴胺受体D2/D3分子探针稳定细胞株进行检测,证明其有效性。(2)对夜交藤进行粗分段(Fr.1~Fr.6),并用其刺激多巴胺受体D2/D3分子探针,结果表明,夜交藤Fr.3、Fr.4部分能激活多巴胺受体D2,Fr.3、Fr.5能够激活多巴胺受体D3。(3)对夜交藤Fr.4进行分离化学成分进行分离,共分离鉴定了9个化合物,得到了9个化合物,分别为7个蒽醌类:ω-羟基大黄素(ω-hydroxy emodin,1),大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(Emodin methyl-8-O-β-D-glucoside,2),大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷(Emodin-8-O-β-D-glucoside,3),大黄素(Emodin,6),大黄酚(Chrysophanol,7),大黄素-6-O-β-D-葡萄糖苷(Emodin-6-O-β-D-glucoside,8),芦荟大黄素(Aloe-emodin,9)一个色原酮决明奈乙酮-8-O-β-D-吡喃葡萄糖(torachrysone-8-O-β-D-glucopyranoside,5),以及一个苯环衍生物没食子酸甲酯(Methyl gallate,4)。其中大黄素-6-O-β-D-葡萄糖苷为首次在夜交藤中分离得到。对Fr.5进行分离得到了三个化合物,分别是大黄素(Emodin,6)、大黄酚(Chrysophanol,7)、芦荟大黄素(Aloe-emodin,9)。(4)利用多巴胺受体D2/D3分子探针对分离得到的9个化合物进行活性检测,发现目前筛选的几个化合物并未激活下游ERK信号分子,这表明夜交藤可通过其他的化合物对多巴胺受体D2/D3发挥作用,或通过其他受体发挥功能。