【摘 要】
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五步蛇毒纤溶酶FⅡ对DIC的作用未见文献报道.该研究是以五步蛇毒纤溶酶FⅡ为研究对象,探索FⅡ在动物实验中对DIC的作用,为FⅡ成为一种新型的抗DIC药物提供实验依据.一、五步
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五步蛇毒纤溶酶FⅡ对DIC的作用未见文献报道.该研究是以五步蛇毒纤溶酶FⅡ为研究对象,探索FⅡ在动物实验中对DIC的作用,为FⅡ成为一种新型的抗DIC药物提供实验依据.一、五步蛇毒纤溶酶FⅡ的制备1.1五步蛇毒纤溶酶FⅡ的分离采用一次DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和两次Sephadex G-75凝胶过滤层析分离FⅡ;SDS-PAGE垂直平板式电泳测定其纯度、分子量;纤维蛋白平板法测定FⅡ的纤溶活性.1.2五步蛇毒纤溶酶FII部分酶学特性的检测1.2.1 FII对人血浆中的纤溶酶原的作用采用发色底物法:不同浓度FII作为给药组,生理盐水作为阴性对照组,尿激酶作为阳性对照组,分别与血浆混匀,37℃保温.反应后15、30、60分钟,取出100 μ l反应液,用纤溶酶活性检测试剂盒,测定血浆中纤溶酶的活性.二、五步蛇毒纤溶酶FⅡ抗DIC的作用采用Jose HERMIDA等的方法建立兔DIC模型.脂多糖以lOOug/kg/h的速度从兔的一侧耳缘静脉滴注的同时,对侧耳缘静脉给药.FⅡ分0.1mg/kg/h(低剂量)、0.3mg/kg/h(中剂量)、0.6mg/kg/h(高剂量)三个剂量组;联合用药为组肝素30IU/kg/h+FⅡ 0.3mg/kg/h;阳性对照组为肝素30IU/kg/h;阴性对照组为生理盐水;另外一组为正常对照组.在给药前和给药2、6小时后分别予以动脉取血,分离血浆,测定给药前和给药后2、6小时的血浆的蛋白C、t-PA、PAI、纤溶酶原、ATⅢ的活性和纤维蛋白原含量,兔肾组织学检查以及观察实验兔6小时内和24小时内死亡率.
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