近几年来,由J亚群禽白血病病毒(ALVs-J)引起的家禽死亡及淘汰率逐年上升,造成的经济损失逐年增加,也严重危害了我们的食品安全。目前检测ALVs-J的方法多存在耗时长、成本高等缺点。因此我们将研究重点放在了低消耗、高灵敏、响应快速、设备低廉、操作简便的免疫分析法上。本文研究了掺氮多孔碳材料、类石墨相氮化碳、纳米纤维素等纳米碳材料及其复合材料的性能,构建了几种不同类型的免疫传感器,实现了对ALVs-J的超灵敏检测。主要分为以下四部分:(1)以纳米金(AuNPs)、伴刀豆球蛋白A(Con A)作为基底,铂纳米粒子修饰的掺氮多孔碳材料(Pt/PCN)做为探针构建了一种新型的电化学免疫传感器。根据之前的报道,Pt/PCN比单纯的Pt或者PCN有更高的催化活性。利用Pt/PCN可大大提高免疫传感器的灵敏度。Pt/PCN的类过氧化物酶活性可以催化对苯二酚的氧化,根据生成的对苯醌的电化学活性,可以实现对ALVs-J的检测。在最佳实验条件下,电化学免疫传感器所得到的还原峰电流与ALVs-J浓度的对数值在102.02 to 104.30 TCID50/m L范围内成正比,检测限为107 TCID50/mL(S/N=3)。此电化学免疫传感器还展现出良好的选择性、重现性和稳定性。(2)本研究基于纳米金与类石墨相氮化碳的复合材料(Au NPs/g-C3N4)构建了一种新型三明治结构电化学免疫传感器,实现了对ALVs-J的超灵敏检测。该免疫传感器具有三重信号放大策略,提高了检测的灵敏性。以Au NPs/g-C3N4为电极修饰材料,增加了电极表面积从而增加了捕获一抗的量;纳米金具有类氧化物酶性质,可以催化检测液中的葡萄糖生成过氧化氢和葡萄糖酸;生成过氧化氢后,所负载的辣根过氧化物酶(HRP)对电信号物质甲苯胺蓝(Tb)显示出极大的电化学生物催化活性。通过对比不同的传感器基底和探针,证实了传感器的信号放大作用。在最佳实验条件下,电化学免疫传感器所得到的氧化峰电流与ALVs-J浓度的对数值在102.22 to 104.30 TCID50/mL范围内成正比,检测限为122 TCID50/mL(S/N=3)。此电化学免疫传感器还展现出良好的选择性、重现性和稳定性。(3)本研究以石墨烯为基底、纳米金纳米纤维素复合物为探针构建了一种新型电化学免疫传感器,实现了对禽白血病病毒的高灵敏检测。石墨烯提高了甲苯胺蓝的负载量,也增加了捕获一抗的量;在过氧化氢存在的条件下,所负载的辣根过氧化物酶(HRP)对电信号物质甲苯胺蓝(Tb)显示出极大的电化学生物催化活性。通过对比不同的传感器探针,证实了传感器的信号放大作用。在最佳实验条件下,电化学免疫传感器所得到的还原峰电流与ALVs-J浓度的对数值在102.08 to 104.00 TCID50/mL范围内成正比,检测限为116 TCID50/mL(S/N=3)。此电化学免疫传感器还展现出良好的选择性、重现性和稳定性。(4)利用自增强电化学发光,以修饰Ru(Ⅱ)复合物的纳米纤维素为探针构建了一种新型免疫传感器,实现了ALVs-J的超灵敏检测。通过共反应剂树状高分子(PAMAM)与发光物质二(2,2’-联吡啶)-4’-甲基-4-羧基联吡啶-钌N-琥珀酰亚胺酯-二(六氟磷酸盐)的复合合成了理想的发光基团。与普通的分子间ECL反应相比,这种分子内的反应电子转移路径短、能量损失少,所以表现出了更高的发光效率。而且,应用Au-PAMAM可以提高Ab1和Ru的负载量。在最佳实验条件下,电化学发光免疫传感器所得到的ECL强度与ALVs-J浓度的对数值在102.02 to 104.30 TCID50/mL范围内成正比,检测限为101TCID50/mL(S/N=3)。此电化学免疫传感器还展现出良好的选择性、重现性和稳定性。