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目的:探讨驱动蛋白超家族蛋白17(Kinesin superfamily protein 17,KIF17)通过参与脊髓水平N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(the 2B subunit of N-methyl-D-aspartate receptor,NR2B)蛋白转运对骨癌痛小鼠痛行为的影响。方法:实验一:40只雄性C3H/HeJ小鼠,4～6周龄,体重20～25 g,随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=8)和骨癌痛组(Tumor组,n=32)。Tumor组小鼠右侧股骨骨髓腔内注射约含2x105个NCTC 2472纤维肉瘤细胞的α-最小必须培养基(a-minimal essence media,α-MEM)20μl用以制备骨癌痛模型,Sham组小鼠右侧股骨骨髓腔注射不含肿瘤细胞的α-MEM 20 μ1。各组于术前1 d(base)、术后4 d、7 d、10 d、14 d行痛行为学测试。术后14 d,Sham组小鼠鞘内注射生理盐水,Tumor组小鼠按随机数字表法分为Ac.A1,、A2、A3组,分别鞘内给予生理盐水、KIF17反义寡核苷酸2.5μg、5μg、10μg,并于给药后2 h、12h、24h、36h、48h检测小鼠痛行为学。实验二:60只雄性C3H/HeJ小鼠,随机数字表法分为假手术组(S组,n=20)和骨癌痛组(T组,n=40),骨癌痛模型制备方法与实验一相一致。每组于术前1 d(base)、术后4 d、7 d、10 d、14d行痛行为学测试,并在相应时间点各取2只小鼠处死,取L3-5脊髓,用蛋白印迹法测定脊髓水平KIF17、mLin10和NR2B蛋白含量。再将T组剩余30只小鼠随机数字表法分为TC、TS和TA组,每组10只。术后14 d起,每天同一时间行鞘内穿刺给药,S组和TC组小鼠注射生理盐水,TS和TA组小鼠分别注射KIF17正义、反义寡核苷酸各5μg,注药容积为5μl,连续给药六天。于术后16 d、19 d、22 d、25 d、28 d、31 d行痛行为学测试,术后19 d、31 d再次测定脊髓水平KIF17、mLin10和NR2B蛋白含量。结果:(1)痛行为学变化:实验一:Sham组和Tumor组小鼠在术前痛行为学基础值差异无统计学意义(P>0.05);在术后7 d、10 d、14 d,与Sham组和基础值相比,Tumor组小鼠自发抬足次数持续增多,机械缩足阈值持续降低,差异有统计学意义(<0.05);术后14 d单次鞘内给予KIF17反义寡核苷酸后,与AC组和给药前相比,三组小鼠均出现自发抬足次数减少,机械缩足阈值升高,差异有统计学意义(P<0.05);A1组小鼠在给药后36 h,A2组和A3组小鼠在给药后48 h,痛行为学恢复到给药前水平。实验二:S组和T组小鼠给药前痛行为学变化与实验一 Sham组和Tumor组给药前相一致;连续鞘内给予KIF17反义寡核苷酸后,与TC和TS组相比,TA组小鼠自发抬足次数减少,机械缩足阈值升高,差异有统计学意义(P<0.05),至术后31 d恢复到给药前水平。(2)蛋白印迹结果:S组和T组小鼠在术前脊髓水平KIF17、mLin10、NR2B蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与基础值相比,T组小鼠在接种后7 d、10 d、14d,脊髓水平KIF17、mLin10、NR2B蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05);与TC、TS组相比,TA组小鼠在连续给药结束后即术后19d,脊髓水平KIF17、mLin10、NR2B蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05),并在术后31 d恢复到给药前水平。结论:KIF17在骨癌痛小鼠疼痛发生中有重要作用;鞘内给予KIF17反义寡核苷酸能有效缓解骨癌痛小鼠的痛行为学,在2.5～5 μg有剂量依赖性;骨癌痛小鼠脊髓水平KIF17、mLin10、NR2B的表达量明显上调;鞘内注射KIF17反义寡核苷酸通过下调脊髓水平KIF17、mLin10、NR2B的表达,抑制了脊髓水平NR2B的转运,有效缓解了骨癌痛小鼠的痛行为学。