背景:新生儿坏死性小肠结肠炎（NECrotizing enterocolitis,NEC）病情危重,随着早产儿存活率增加,NEC发病率呈增高趋势,内科手术治疗效果欠佳的患儿需手术治疗,手术死亡率可高达50%。外科过早干预,对患儿生长发育有显著影响;切除过晚,增加病死率及并发症。因此精准把握手术时机十分重要。目前已有研究发现肠道相关标志物能够在血液、粪便、尿液中检测,反映NEC病情变化。抽取血液为有创操作,禁食患儿大便量少不易获取,而尿液方便易取,可做为理想的标本来源。通过检索文献确定紧密连接蛋白Claudin-3、高迁移率蛋白B1（High‐mobility group box 1,HMGB-1）、人β防御素-2（Humanβ-defensin-2,HBD-2）、肠特异性抵抗分子（Intestinal-specific resistance molecule,Relm-β）能够在尿液中检测,且随病情严重程度呈升高趋势。本研究旨在明确这些尿液相关生物标志物预测新生儿坏死性小肠结肠炎手术时机的价值。方法:纳入2019年3月至2020年11月在重庆医科大学附属儿童医院新生儿中心住院治疗的明确诊断NEC Bell-IIB期及以上患儿为研究对象。根据患儿住院期间是否行手术治疗且达手术指针,分为手术组和非手术组。收集每位患儿诊断NEC后24小时内尿液标本,采用酶联免疫吸附实验（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）批量测定尿液中HMGB-1,Claudin-3,HBD-2,Relm-β蛋白浓度。同时收集并统计分析患儿信息。结果:本研究期间纳入75例,排除24例,最终纳入研究51例。其中手术组25例,非手术组26例。手术组患儿尿液Claudin-3,HBD-2,HMGB-1,Relm-β浓度均高于非手术组,尿液Claudin-3,HMGB-1,Relm-β两组间浓度具有显著差异（p<0.05）;进一步绘制尿Claudin-3,HMGB-1,Relm-β的ROC曲线,结果提示三种生物标志物在评估NEC手术时机中有中等价值(AUC(Claudin3)=0.774 p=0.001;AUC(HMGB1)=0.874,p=0.000;AUC（Relm-β）=0.0.819,p=0.000)。手术组患儿较非手术组患儿更易出现腹胀（p<0.05）,非手术组患儿较手术组患儿更多的出现肠壁积气（p<0.05）。尿液Claudin-3、HMGB-1、Relm-β联合临床表现腹胀、影像学检查门脉积气评估NEC手术时机(AUC（≥3项）=0.921,p=0.000)。结论:尿液Claudin-3,HMGB-1,Relm-β浓度水平具有辅助诊断NEC手术时机的价值,若联合临床表现腹胀、影像学检查门脉积气评估手术指针具有高度特异性。