【摘 要】
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为了研究2019年从猪肺组织分离鉴定出的30株不动杆菌的菌种归属及其致病性,利用分子生物学鉴定方法对30株不动杆菌进行菌种鉴定,并选取不同菌种的不动杆菌进行小鼠的致病性试验,为猪源不动杆菌的菌种鉴定及致病性研究提供依据。首先扩增bla OXA-51-like基因鉴定出鲍曼不动杆菌,再分别扩增rpo B zone1、rpo B zone2、gyr B基因进行测序分析鉴定非鲍曼不动杆的菌种,并以两种或
【基金项目】
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山西省重点研发计划重点项目:动物功能产品疫病控制基因工程苗关键技术研究与应用（201703D211001）；
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为了研究2019年从猪肺组织分离鉴定出的30株不动杆菌的菌种归属及其致病性,利用分子生物学鉴定方法对30株不动杆菌进行菌种鉴定,并选取不同菌种的不动杆菌进行小鼠的致病性试验,为猪源不动杆菌的菌种鉴定及致病性研究提供依据。首先扩增bla OXA-51-like基因鉴定出鲍曼不动杆菌,再分别扩增rpo B zone1、rpo B zone2、gyr B基因进行测序分析鉴定非鲍曼不动杆的菌种,并以两种或三种鉴定方法菌种结果一致为最终鉴定结果。结果:30株不动杆菌中,有2株（6.67%）鉴定为鲍曼不动杆菌,28株（93.3%）为非鲍曼不动杆菌。非鲍曼不动杆菌中,有6株（21.4%）鉴定为A.lwoffii、12株（42.9%）鉴定为A.towneri、5株（17.9%）鉴定为A.junii、3株（10.7%）鉴定为A.ursingii,2株仅被一种方法鉴定,未确定菌种。最终30株不动杆菌仅有28株（93.3%）确定了菌种。将鉴定出的2株鲍曼不动杆菌和4株A.lwoffii、A.towneri、A.junii、A.ursingii非鲍曼不动杆菌,分别以1.0×10~5、1.0×10~6、1.0×10~7、1.0×10~8、1.0×10~9CFU/m L细菌浓度的试验组及生理盐水对照组,腹腔注射小鼠（0.3 m L/只）,测定其半数致死量,观察小鼠的临床表现并进行病理剖检学观察及组织病理学检查。结果:2株鲍曼不动杆菌的LD50分别为1.20×10~7CFU/m L和1.26×10~7CFU/m L,剖检死亡小鼠发现其肺脏淤血且肿大;非鲍曼不动杆菌高浓度组的小鼠仅有临床表现,但未致死,处死并剖检患病小鼠发现其肺脏偶有出血点、肿大;鲍曼不动杆菌和非鲍曼不动杆菌试验组的小鼠肝脏、脾脏、肾脏均无明显异常。组织病理学观察发现,鲍曼不动杆菌致死小鼠的肺脏及肝脏有炎性细胞浸润及充血;非鲍曼不动杆菌患病小鼠的肺脏及肝脏有少量炎性细胞浸润;鲍曼不动杆菌和非鲍曼不动杆菌试验组的小鼠脾脏和肾脏病理观察均未见明显异常。结论:鉴定出2株鲍曼不动杆菌,28株非鲍曼不动杆菌;非鲍曼不动杆菌中6株为A.lwoffii、12株为A.towneri、5株为A.junii、3株为A.ursingii。鲍曼不动杆菌高浓度接种可致死小鼠,非鲍曼不动杆菌高浓度接种仅使小鼠感染但不致死。
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