目的:分析GATA5在肝癌HLE细胞系中干扰表达后和GATA5在肝癌HepG2细胞系过表达后对癌细胞生长、迁移、侵袭的恶性行为影响;分析GATA5对PI3K/AKT通路的调控、对癌基因Ras、Src的表达影响;分析GATA5对Beta-catenin通路的调控、癌干细胞因子C-myc、Sox2的表达影响;分析AFP对GATA5功能的影响。方法:1.构建cmv-GATA5慢病毒表达载体;pcDNA3.1-AFP、pTT5-PTEN表达载体;构建siRNA-GATA5、siRNA-AFP干扰表达载体。2.MTT检测GATA5对肝癌细胞HLE、HepG2增殖的影响。3.Transwell实验检测细胞迁移。4.细胞划痕实验检测细胞划痕修复能力。5.Western blot检测目的蛋白表达变化。6.免疫荧光实验,通过激光共聚焦显微镜观察目的蛋白表达及位置变化。结果:cmv-GATA5在HepG2细胞中表达GATA5,siRNA-GATA5干扰HLE细胞中的GATA5表达,pcDNA3.1-AFP在HLE细胞中表达AFP、siRNA-AFP干扰HepG2细胞中AFP的表达,pTT5-PTEN在HLE、HepG2细胞中表达PTEN。GATA5降低细胞的增殖率、抑制细胞迁移。GATA5抑制PI3K/AKT通路,抑制Ras、Src癌基因表达;GATA5抑制Beta-catenin通路,抑制干细胞因子Sox2、C-myc表达;AFP抑制GATA5功能后激活PI3K/AKT通路。结论:1.GATA5能够抑制肝癌细胞HLE、HepG2的增殖、迁移、划痕修复等恶性行为。2.GATA5能够抑制AKT通路,抑制癌基因Ras、Src表达;GATA5可能通过抑制Beta-catenin通路,抑制干细胞因子C-myc、Sox2的表达。3.AFP能够抑制GATA5功能激活PI3K/AKT通路。