目的 近日节律基因不但能通过自身表达和调控产生自激振荡而产生生物节律,同时还参与其他方面的调控。研究发现mPer1表达变化与小鼠的药物依赖存在明显的相关性,mPer2与肿瘤的发生发展密切相关,因此有必要对这两个基因进行直接深入的研究。通过调节节律基因减轻动物对毒品的依赖,增加节律基因在肿瘤细胞中的表达抑制肿瘤细胞的生长,研究近日节律基因在生物节律振荡以外的功能,研究近日节律基因信号传出的通路、机制。研究节律基因Period1在药物精神依赖形成中的作用,寻求药物成瘾的基因治疗方法。研究节律基因Period2对肿瘤细胞的生长抑制及诱导分化凋亡的作用。 方法与结果 1、mPer1与药物依赖关系及其基因治疗研究 方法 设计以节律基因Period1转录产物mRNA为切割靶点的核酶per1RZ,构建以真核表达质粒pcDNA 3.1为基础的核酶per1RZ表达质粒pcDNA 3.1—per1RZ。体外转录切割反应证实质粒pcDNA 3.1—per1RZ的转录产物核酶per1RZ具有切割Period1转录产物mRNA的能力。建立动物精神依赖模型,脑室注射pcDNA 3.1—per1RZ,研究核酶per1RZ阻断节律基因Period1表达对BALB/C小鼠精神依赖形成的影响。