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目的：建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,观察大鼠大脑Caspase-9蛋白的表达情况及米诺环素对神经细胞凋亡和Caspase-9蛋白表达的影响,试图阐明米诺环素的抗凋亡机制及为临床应用米诺环素提供实验室数据。方法：采用大脑中动脉线栓闭塞法(线栓法)制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血120分钟后恢复再灌注72小时。36只健康成年雄性SD大鼠(250±10)g,随机分为假手术组(sham)(n=12)、缺血再灌注组(I/R)(n=16)、米诺环素干预组(M1/R)(n=8)。取假手术组4只,缺血再灌注组和米诺环素干预组8只,用于神经功能评分及TTC染色；各组8只用于HE染色、TUNEL及免疫组化。依据Zealonga神经功能评分判断造模是否成功,采用光镜观察分析受损组织细胞的形态学改变,采用TUNEL方法对缺血损伤的神经细胞DNA损伤情况进行观察,应用PCR技术检测Caspase-9蛋白的表达水平,评价米诺环素的神经保护作用。结果：1、神经缺失症状：假手术组大鼠未出现任何神经缺失症状；缺血再灌注组大鼠出现不同程度的神经功能缺损。2、TTC染色：假手术组大鼠脑组织呈红色；缺血再灌注组梗塞苍白区域位于额顶颞叶皮质及纹状体外侧部。3、HE染色：假手术组神经细胞形态结构正常；缺血再灌注组缺血半暗带(部分额叶皮层及纹状体内侧区)及海马CA1区脑组织结构变疏松,间质水肿伴有空腔形成,神经细胞数量减少,体积缩小,排列紊乱疏松,神经细胞核固缩,染色质边集；米诺环素干预组相比缺血再灌注组缺血半暗带区、海马CA1区结构完整的神经细胞明显增多,和凋亡细胞交错存在。4、TUNEL:假手术组仅有零星凋亡细胞分布；缺血再灌注组凋亡细胞显著增多(P<0.05)；米诺环素干预组与缺血再灌注组比较,凋亡细胞明显减少,但高于假手术组(P<0.05)。5、免疫组化：假手术组Caspase-9蛋白微量表达；缺血再灌注组表达明显增强(P<0.05),其表达的空间分布与TUNEL结果一致；与假手术组比较,米诺环素干预组Caspase-9表达亦有增强,但比缺血再灌注组表达减弱(P<0.05)。结论：1、大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO)能使大脑组织Caspase-9蛋白表达增加。2、缺血再灌注组与米诺环素干预组Caspase-9蛋白表达均有所增加且缺血再灌注组增加比米诺环素干预组更明显。3、米诺环素可减轻缺血再灌注后脑组织病理改变,具有神经保护作用。4、米诺环素对脑缺血再灌注引起的缺血半暗带、海马CA1区神经细胞凋亡有明显抑制作用。5、米诺环素可有效抑制脑组织Caspase-9蛋白的表达。