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为了深入研究体外酶解豆粕相关的工艺技术参数并初步评价酶解豆粕的饲用价值,本论文在课题组对酶解豆粕研究基础上,采用两个试验比较系统的研究蛋白酶对豆粕体外水解的适宜条件并初步考察了酶解豆粕的饲用效果。 试验一:体外蛋白酶酶解豆粕相关参数的确定 采用一系列单因素实验研究了Alcalase、中性蛋白酶、Flavourzyme、酸性蛋白酶的适宜反应条件及适宜水平,并在单因素实验基础上,采用三因素二次回归正交实验研究Alcalase+Flavourzyme+时间t、中性蛋白酶+酸性蛋白酶+时间t与豆粕TCA-NSI、氨基氮之间的定量化关系。Alcalase水解豆粕的适宜条件:温度60℃,初始pH是7.9-9.0,反应时间4-7小时,酶水平0.012A-0.024AU/g豆粕:中性蛋白酶水解豆粕的适宜条件:温度50℃,初始pH6.6,反应时间4-6小时,酶水平500-1000U/g豆粕。同时使用Alcalase与Flavourzyme水解豆粕,在温度50℃,未外加任何酸碱的pH条件下,适宜的水平为:Alcalase0.006-0.021AU/g豆粕,Flavourzyme为2 LAPU/g豆粕,反应时间6-10.5小时,此时氨基氮含量8.807%-13.33%,TCA-NSI为31.66%-56.53%。在温度50℃,未外加任何酸碱的pH条件下,中性蛋白酶与酸性蛋白酶合用水解豆粕的适宜水平为:中性蛋白酶200-1100U/g豆粕,酸性蛋白酶100U/g豆粕,反应时间6-10.5小时,此时氨基氮含量6.76%-9.54%,TCA-NSI为32.22%-54.58%。 试验二:酶解豆粕对断奶仔猪的饲喂效查研究 试验采用单因子设计,以普通豆粕为对照,比较中性蛋白酶与酸性蛋白酶合用和Alcalase与Flavourzyme合用的酶解豆粕的饲喂效果。选择21头24±1日龄DLY断奶仔猪随机分为3个处理,每个处理7个重复,每个重复1头猪。试验期21天。与对照组相比,中性蛋白酶+酸性蛋白酶联合水解豆粕组,第2周、3周及全期平均日采食量(ADFI)有下降的趋势,分别为:6.68%(p>0.05)、11.03%(p>0.05)、7.73%(p>0.05)。但日增重(ADG)却呈提高趋势,幅度为4.57%(p>0.05),从而料肉比下降12.94%(p>0.05)。Alcalase联合Flavouryme水解豆粕使得断奶仔猪整体生长性能下降,全期ADFI降低26.32%(p<0.05),全期ADG降低34.70%(p<0.05),全期料肉比增加15.63%(p>0.05)。从腹泻指数来看,两个试验处理酶解豆粕都呈现下降趋势,三个处理总体差异接近显著水平(p=0.08)。在本试验条件下,中性蛋白酶与酸性蛋白酶合用的水解豆粕对断奶仔猪的营养价值优于Alcalase与Flavouryme合用的水解豆粕。 以上试验结果表明内切蛋白酶可有效的降解豆粕的大豆蛋白,内切酶与外切酶合用可提高酶解效率,增加水解度(DH),还可能降低酶解豆粕的苦味程度。中性蛋白酶与酸性蛋白酶合用水解豆粕可较大幅度的降低仔猪料肉比,断奶仔猪整体生产性能优于Alcalase与Flavouryme合用水解豆粕处理。