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一、研究目的1、观察蜂毒素对肝癌细胞的生长抑制效应；2、观察蜂毒素对肝癌细胞的周期阻滞效应；3、探索蜂毒素对肝癌细胞中HMGB1相关信号通路的影响。二、研究方法1、通过MTT法，研究不同时间及浓度蜂毒素，对人肝癌细胞的生长抑制作用；2、通过流式细胞仪检测蜂毒素诱导人肝癌细胞周期阻滞效应及其剂量关系；3、通过Western blotting，检测蜂毒素对人肝癌细胞中HMGB1、VEGF-C及VEGF-D蛋白表达的影响；4、通过qRT-PCR，检测蜂毒素对人肝癌细胞中HMGB1、VEGF-C及VEGF-DmRNA表达的影响。三、研究结果（一）MTT法观察到蜂毒素对多种肝癌细胞（MHCC97H、QGY-7701、BEL-7402、HepG2、SMMC-7721）的生长具有抑制作用。当作用时间为24h，药物浓度为4μg/mL时，五种人肝癌细胞的存活率均小于60%，而药物浓度为8μg/mL时，存活率均小于10%；当作用时间为48h、72h，药物浓度为2μg/mL时，人肝癌细胞HepG2存活率小于10%。（二）流式细胞仪技术检测，蜂毒素能够诱导人肝癌细胞HepG2阻滞于S期，当作用时间为24h，药物浓度为4μg/mL时，细胞S期比例明显上升。（三）Western blotting检测，不同浓度蜂毒素作用细胞24h，以及4μg/mL蜂毒素作用细胞0h、15min、30min、1h、2h后，均可抑制HMGB1的蛋白表达。（四）qRT-PCR检测，不同浓度蜂毒素作用人肝癌细胞HepG224h后，以及4μg/mL蜂毒素作用细胞0h、15min、30min、1h、2h后，均可抑制HMGB1、VEGF-C及VEGF-D的mRNAs表达。四、结论蜂毒素可抑制肝癌细胞生长，阻滞细胞周期于S期，并可能通过抑制HMGB1、VEGF-C及VEGF-D的表达发挥抗肿瘤作用。