论文部分内容阅读
目的:本研究通过十组模型组比较及逍遥散汤剂与颗粒剂比较,以制备成熟高催乳激素血症大鼠模型及适宜药物剂型,为探讨“肝脾为核心靶向干预高催乳激素血症模型动物卵巢颗粒细胞凋亡机制”奠定基础。同时,对高催乳激素血症的作用机制及靶点提供新的理论依据,并提出一个新的治疗方法和安全有效的方药,为中医药对女性疑难病症的治疗提供一个科学的依据。方法:十种高催乳激素血症动物模型初筛:随机分为正常空白组;胃复安1组;胃复安2组;胃复安3组;舒必利针1组;舒必利针2组;乙烯雌酚针组;乙烯雌酚片组;氟哌啶醇组;垂体1组;垂体2组;除正常空白组外,并分别给予相应造模处理。初筛后,再次五种HPRL动物模型筛选。造模结束后将大鼠处死,取血及卵巢,采用放免法及酶联免疫法测血清泌乳素水平及HE染色观察卵巢组织形态学改变。加味逍遥散汤剂与颗粒剂比较:在成熟动物模型成功制备后随机分为正常空白组;阴性对照组;加味逍遥散中剂量颗粒组;加味逍遥散中剂量汤剂组;除正常空白组外,并分别予以治疗,治疗结束后将大鼠处死,取血及卵巢,采用放免法及酶联免疫法测血清泌乳素水平及HE染色观察卵巢组织形态学改变。卵巢颗粒细胞凋亡机制研究:在成熟动物模型成功制备及药物制剂研究后随机分为正常空白组;阴性对照组;加味逍遥散高、中、低剂量组;溴隐亭组;除正常空白组外,并分别予以治疗,治疗结束后将大鼠处死,取血及卵巢,采用放免法及酶联免疫法测血清泌乳素水平,采用HE染色观察卵巢卵泡形态学改变,通过免疫组化法检测(?)bax、bcl-2表达差异观察各组卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果:十种HPRL动物模型初筛及再次五种动物模型筛选:与正常空白组血清催乳素比较,胃复安1组、2组、3组血清催乳素明显升高(P<0.01),垂体1组、2组血清催乳素升高(P<0.05),余下各造模组血清催乳素均有升高趋势;与正常空白组卵泡发育情况比较,胃复安3组造模组各级卵泡总数明显下降、闭锁卵泡数明显增加、闭锁卵泡/总卵泡明显增加、最大卵泡直径明显减小。加味逍遥散汤剂与颗粒剂比较:与正常空白组比较,加味逍遥散汤剂与颗粒剂均能有效的促进卵泡发育、减低催乳素水平的作用;从促卵泡发育及降催乳素比较,两种剂型无差异。卵巢颗粒细胞凋亡通路的研究:与正常空白组相比,阴性对照组泌乳素水平明显升高;各治疗组可降低泌乳素水平,可有效改善卵泡发育。加味逍遥散可使卵巢颗粒细胞bcl-2表达明显增强,Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加,从而抑制卵巢细胞凋亡。结论:胃复安3组血清催乳素明显升高、各级卵泡总数明显减少、闭锁卵泡增加、闭锁卵泡/总卵泡值增大、卵泡最大直径明显减小,故为最优模型;加味逍遥散汤剂与颗粒剂在降催乳素水平及促卵泡发育上两种剂型无明显差异,最终选择简单、易操作的汤剂为实验剂型;加味逍遥散治疗高催乳激素血症有良好疗效,其作用机理可能是通过降低血清泌乳素水平、有效促进卵泡发育、调节卵巢颗粒细胞bcl-2、bax表达及比值这一系列的途径实现的。