【摘 要】
：
研究背景动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是引起心血管事件的根本原因,其病理学基础包括血脂代谢异常、血管内皮细胞损伤和血管慢性炎症免疫反应。来源于先天性和适应性免疫系统的多种细胞可促进AS病变的发展。粥样斑块中T淋巴细胞可识别自身抗原引起一系列免疫炎症反应,释放多种炎症因子加重炎症反应促进AS形成。热休克蛋白65（heat shock protein 65,HSP65）是一种高度
【基金项目】
：
广州市科技计划项目201510010090； 广东省教育厅省级重大项目2014KZDXM020；
论文部分内容阅读
研究背景动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是引起心血管事件的根本原因,其病理学基础包括血脂代谢异常、血管内皮细胞损伤和血管慢性炎症免疫反应。来源于先天性和适应性免疫系统的多种细胞可促进AS病变的发展。粥样斑块中T淋巴细胞可识别自身抗原引起一系列免疫炎症反应,释放多种炎症因子加重炎症反应促进AS形成。热休克蛋白65（heat shock protein 65,HSP65）是一种高度保守蛋白,具有较强的免疫原性,易被机体免疫系统识别。有研究结果证实HSP65可与T细胞受体（T cell receptor,TCR）相互结合引发强烈的免疫炎症反应,而被活化的T淋巴细胞可以通过释放各种代谢酶、毒素及炎症信号通路蛋白促进AS的发生发展。ZAP70是TCR信号通路的关键调节点,可影响T淋巴细胞的生理功能。我们课题组的前期研究结果证实:皮下免疫HSP65可促进炎症反应,进而损害HDL功能,加速AS的发展。但HSP65是否通过ZAP70信号通路影响T淋巴细胞增殖、免疫炎症通路激活及逆胆固醇转运功能下降国内外还未见相关报道。研究目的以ZAP70阳性的Jurkat T淋巴细胞和ZAP70阴性的P116T淋巴细胞为研究对象,研究TCR信号通路关键调节点ZAP70在HSP65介导的T淋巴细胞增殖及逆胆固醇转运功能的作用。同时运用慢病毒shRNA-ZAP70转染Jurkat T淋巴细胞阻断ZAP70信号通路,进一步验证ZAP70在HSP65影响T淋巴细胞生理活动的作用机制。第一部分研究方法1.使用HSP65干预人CD4+T淋巴细胞和Jurkat T淋巴细胞,运用CCK-8、WST-1、细胞周期测定等技术检测T淋巴细胞增殖能力;2.使用HSP65干预人CD4+T淋巴细胞和Jurkat T淋巴细胞,运用[3H]-cholesterol检测胆固醇流出率。研究结果1.HSP65干预T淋巴细胞可以促进T淋巴细胞增殖;2.HSP65干预T淋巴细胞可以减少胆固醇流出率。第二部分研究方法1.慢病毒shRNA-ZAP70转染Jurkat T淋巴细胞阻断ZAP70信号通路,流式细胞仪检测慢病毒转染效果,WB及qPCR检测慢病毒沉默效果。运用WB技术检测P116 T淋巴细胞ZAP70蛋白表达水平;2.使用HSP65干预Jurkat T淋巴细胞,运用WB技术检测ZAP70蛋白磷酸化表达;3.阻断ZAP70信号通路,使用WST-1测定等技术检测HSP65干预状态下T淋巴细胞增殖;4.使用[3H]-cholesterol检测,在阻断ZAP70信号通路的情况下HSP65对T淋巴细胞胆固醇流出率的影响,并使用WB、qPCR等技术检测胆固醇转运相关蛋白及mRNA的表达水平;5.阻断ZAP70信号通路,使用WB和免疫荧光技术检测对HSP65激活T淋巴细胞核因子NF-κB的影响。研究结果1.HSP65干预T淋巴细胞可增加ZAP70磷酸化;2.阻断ZAP70减少HSP65介导和非HSP65介导的JurkatT淋巴细胞增殖;3.阻断ZAP70增加HSP65介导和非HSP65介导的Jurkat T淋巴细胞胆固醇流出率及转运蛋白的表达;4.阻断ZAP70减少HSP65介导和非HSP65介导的Jurkat T淋巴细胞NF-κB激活。总结1.HSP65可活化T淋巴细胞ZAP70;2.阻断ZAP70可抑制HSP65介导的T淋巴细胞增殖;3.阻断ZAP70可增加HSP65介导的T淋巴细胞胆固醇流出率及转运蛋白表达;4.阻断ZAP70可抑制HSP65介导的T淋巴细胞NF-κB激活;5.通过研究,我们实验证实阻断ZAP70可增加HSP65介导的T淋巴细胞逆胆固醇转运功能,抑制细胞增殖及NF-κB激活。
其他文献
研究背景鼻咽癌是发生于鼻咽上皮的恶性肿瘤,好发于中国华南地区和亚洲东南部。鼻咽癌发病隐匿,恶性程度较高,早期即可出现颈部淋巴结转移,其发生是一个多阶段、多途径、多机制、多遗传变异积累的复杂过程,目前认为主要与EB病毒的感染、遗传易感性及环境因素有关。虽然放疗能有效地控制早期鼻咽癌,但是晚期患者的平均5年生存率仍低于30-40%。更严重的是,由于早期没有显著的症状,临床上超过60%的鼻咽癌患者容易被
胃肠间质瘤（Gastrointestinal stromal tumors,GISTs）是胃肠道最常见的间叶肿瘤。因GISTs存在异质性,如何准确判断其的危险度一直是困扰医生的难题。然而无论术前还是术后,准确评估原发性GISTs的生物学行为对医生的临床决策均十分重要:在术前,有助于医生及时干预肿瘤的进展,增加患者治愈的机会。在术后,能辅助医生选择合适的患者进行靶向治疗。本研究旨在评估手术前后原发性
背景和目的背景:炎症性肠病（inflammatory bowel disease,IBD）是一种病因及发病机制尚不明确的非特异性慢性肠道炎症性疾病,包括溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）和克罗恩病（Crohn’s disease,CD）。IBD的特点是慢性、反复性、迁延性发展进程,并可能出现诸如肠纤维化及癌变等严重并发症。目前研究表明,多种因素如感染、化学和物理刺激及自身免
癫痫是一种常见的慢性中枢神经系统疾病,其特征为反复发作的大脑神经元异常同步化放电,导致暂时性大脑功能失调。癫痫持续状态时死亡率高达20%。慢性癫痫长期反复发作也可引起不可逆的神经功能损害,导致遗留严重的认知功能损害和行为改变。癫痫形成过程被定义为正常的大脑发展成为慢性癫痫状态的一个过程,该过程涉及基因、分子、细胞甚至是环路上层面上的各种变化,其机制尚未明确。目前临床上大部分已知的有效抗癫痫药物也仅
肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是目前世界上致死率最高的恶性肿瘤之一,也是我国发病率和死亡率位居前列的肿瘤之一,手术、化疗和放疗等方法仍是目前治疗肝癌的主要手段,但是其治疗效果并不十分理想。因此,探索肝癌发生的分子调控机制以及在此基础上寻求肝癌治疗的新策略有着极为重要的意义。DcR3（decoy receptor 3,诱骗受体3,又称TR6）,是近年发现的一种新
抑郁症是最常见的心境障碍疾病,具有发病率高、致残率高、负担重等特点。首先,发病率高,全球大概有3.5亿的抑郁症患者。在人的一生中,抑郁症的发病率是12%-17%。其次,致残率高,在2010年,抑郁症是全球致残因素的第二位。每年约有100万抑郁症病人自杀死亡（90%的自杀源自抑郁）。最后,抑郁症带来的社会负担极其重。患者治愈过程漫长且病情容易反复,导致其丧失劳动价值,还会增加社会和家庭的负担,成了一
目的探讨 TUSC3 基因在非小细胞肺癌（non-small cell lung carcinoma,NSCLC）细胞增殖及进展中的作用及相关分子机制。材料和方法收集惠州市中心人民医院NSCLC标本383例,制作组织芯片,采用免疫组化SP法检测NSCLC组织中TUSC3的表达,分析TUSC3表达与临床病理特征的关系及与EGFR、自噬相关蛋白、Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达之间的相关性。
抑郁症（Major depressive disorder,MDD）是最为常见的精神疾病,具有高发病率、高致残率等特点,在精神疾病总负担中排名首位。在全世界范围内约有10%的男性和约20%的女性患有抑郁症。据世界卫生组织的报道,在全世界范围内有3.4亿的抑郁症患者,每年有1000～2000万的患者有自杀倾向,根据其发展趋势预测,到2020年抑郁症将晋升为首位致残原因,成为21世纪人类的主要杀手之一
背景与目的世界范围内,乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤之首,我国发病率也呈逐年上升趋势。患者年龄、月经情况、肿瘤组织学分级、病期早晚（主要包括肿瘤大小、腋窝淋巴转移及pTNM分期）、ER/PR表达、HER-2表达状况是乳腺癌重要的临床因素,在指导危险度分级、分子学分型、治疗实施及预后评估等方面具有较为重要的临床意义。催乳素（Prolactin,PRL）生物学功能极为广泛,学者们统计多达300多种,几乎
有研究认为生酮饮食（KD）对退行性神经疾病有神经保护作用。本课题组的前期研究发现KD和隔日生酮饮食（EODKD）上调脊髓组织乙酰化水平,抑制急性颈脊髓挫伤的氧化应激。本研究在新型的大鼠颈脊髓半侧挫伤模型基础上探讨酮体代谢对脊髓损伤抗氧化应激的作用,及酮体代谢对大鼠颈脊髓继发性损伤的行为学及形态学改变。第一部分:基于位移控制的新型的大鼠颈脊髓半侧挫伤模型研究背景及目的:已有采用力控制的大鼠颈脊髓半侧