超声波辅助提取甜葫芦中葫芦素及其抑菌作用的研究

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甜葫芦(Lagenaria siceraria (Molina) Standl. var.hispisa (Thund.) Hara)为一年生匍匐性的草本植物,又称“肉葫芦”、“菜葫芦”、“夜来花”,日本称干瓢,是瓢瓜的一种,它具有很好的药用价值和食用价值。在日常生活中,人们主要把甜葫芦鲜厚的果肉作为食用的部位,它具有很高的营养价值,含有多种营养物质,如果糖、葡萄糖、维生素、钙、钾、磷等,甜葫芦还含有一种重要的高度氧化的植物次生物质为葫芦素,葫芦素属于四环三萜类物质。据调查,医学研究人员利用其研制成了葫芦素片、葫芦素胶囊,其主要功效是抗癌,其制品对高血压、高血脂、动脉硬化、糖尿病等疾病也有一定的功效。在生态系统中,多种植食性的动物和病原菌会侵害葫芦科的植物,而此时作为异源化学信息素葫芦素可以有效避免这种侵害作用的发生。此外,葫芦素可以促进细胞的免疫功能,具有消退黄疸,清除腹水及抑制肝纤维的增生等多种生物活性。我国拥有丰富的甜葫芦资源,本研究为了更好的开发与利用甜葫芦的资源,以提高其得率为目的,以葫芦素B与葫芦素E为研究对象,利用超声波细胞粉碎机进行提取,利用大孔树脂进行分离纯化,并在此基础上利用葫芦素B与葫芦素E进行抑菌试验。试验结果如下:1、通过单因素试验与正交试验得到葫芦素B和葫芦素E的最佳提取条件均为:料液比为1:10、溶剂浓度为70%、超声时间为15min、超声波功率为500W。在最佳的提取条件提取葫芦素B和葫芦素E,得到葫芦素B的得率为0.799%,葫芦素E的得率为0.695%。2、通过4种大孔树脂进行纯化葫芦素B与葫芦素E的静态吸附试验,得到纯化葫芦素B与葫芦素E的最优树脂均为XAD-16;葫芦素B在5h后基本达到稳定平衡状态,葫芦素E在4h后基本达到稳定平衡状态。通过大孔树脂对葫芦素B与葫芦素E的动态吸附动力学纯化试验,得到的大孔树脂对葫芦素B的最佳动态吸附动力学试验条件为上样流速为3mL/min、洗脱流速为2mL/min、洗脱液乙醇浓度为50%;大孔树脂对葫芦素E的最佳动态吸附动力学试验条件为上样流速为3mL/min、洗脱流速为3mL/min、洗脱液乙醇浓度为50%。由动态吸附与解析试验得到的最佳纯化条件进行大孔树脂对葫芦素B与葫芦素E的纯化试验,得到纯化产物中葫芦素B的达到68%,葫芦素E的达到14%,说明XAD-16大孔树脂纯化葫芦素的效果良好。3、通过葫芦素B与葫芦素E对大肠杆菌、啤酒酵母菌、黑曲霉菌的抑菌试验,确定了葫芦素B与葫芦素E对大肠杆菌、啤酒酵母菌、黑曲霉菌均具有一定的抑制效果。葫芦素B对大肠杆菌、啤酒酵母菌、黑曲霉菌的平均抑菌圈直径分别为10.9mm,8.1mm,10.4mm;对大肠杆菌、啤酒酵母菌、黑曲霉菌的最低抑菌浓度范围分别为0.0625g/mL-0.125g/mL,0.0625g/mL-0.125g/mL,0.125g/mL-0.25g/mL。葫芦素E对大肠杆菌、啤酒酵母菌、黑曲霉菌的平均抑菌圈直径分别为11.3mm,9.5mm,8.7mm;对大肠杆菌、啤酒酵母菌、黑曲霉菌的最低抑菌浓度范围分别为0.0625g/mL-0.125g/mL,0.03125g/mL-0.0625g/mL,0.25g/mL-0.5g/mL。
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