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目的：用GM-CSF、LPS体外诱导小鼠骨髓单个核细胞向树突状细胞(DC)分化及成熟,建立小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)体外扩增模型。在BMDC诱导分化及成熟的不同阶段加入不同浓度的rmIL-17,探讨IL-17A对BMDC分化及成熟的影响。方法：为建立小鼠骨髓来源的树突状细胞(BMDC)体外扩增模型,取6-8周的Balb/c小鼠的胫骨和股骨,用RPMI-1640培养基反复冲洗骨髓腔,裂解红细胞获得骨髓单个核细胞。制备2×106细胞/ml加入含200U/mlGM-CSF10%胎牛血清的RPMI-1640完全培养液培养8天,每隔3天补充新鲜培养液。收获悬浮生长细胞,用磁珠分选技术纯化CDllc+细胞。纯化细胞加入LPS刺激继续培养36h使其充分成熟。采用流式细胞术检测BMDC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC Ⅱ的表达,采用ELISA方法检测BMDC培养上清液中细胞因子IL-12p40、IL-10、IL-6及TNF-α的分泌。为了进一步探讨IL-17A在BMDC分化及成熟过程中的作用,在用GM-CSF诱导BMDC分化时,分别加入低浓度及高浓度的rmIL-17A(10ng/ml、100ng/ml),8天后收获悬浮生长细胞,分离纯化的CD11c+细胞加入LPS及／或不同浓度的rmIL-17A(50ng/ml、100ng/ml、500ng/ml)继续培养24h。利用流式细胞技术和ELISA方法分别检测细胞表面共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC II的表达量以及细胞因子IL-12p40和IL-10的分泌。结果：小鼠骨髓来源的单个核细胞经GM-CSF诱导6-8天后细胞大量增殖并呈典型的DC细胞形态。LPS能够有效的刺激GM-CSF诱导分化BMDC的成熟,表现为BMDC表面共刺激分子CD40、CD80和CD86的表达明显高于不加LPS刺激组；细胞培养上清液中细胞因子IL-12p40、IL-10、IL-6和TNF-a的分泌量较不加LPS刺激组显著增加。为了探索IL-17A对BMDC前体表型和分化的影响,分离获得BMDC前体细胞,加入低浓度rmIL-17A(10ng/ml)或高浓度rmIL-17A(100ng/ml)联合GM-CSF培养8天。结果显示：IL-17A能够促进GM-CSF诱导的BMDC表面共刺激分子CD40、CD86和MHCII的表达,且具有一定的剂量依赖性。为了证实IL-17A能否对已分化BMDC的成熟产生影响,我们向GM-CSF诱导8天的BMDC中加入不同浓度的rmIL-17A(50,100或者500ng/m1)继续培养培养36小时。结果显示,与不加rmIL-17A的对照组比较,加入不同浓度的IL-17A及各浓度rmIL-17A组之间BMDC表面共刺激分子CD40、CD80、CD86和MHC Ⅱ的表达量均没有明显变化,且各组培养上清中IL-12p40和IL-10的含量没有明显变,提示IL-17A不具有刺激已分化的BMDC成熟的功能。但在GM-CSF诱导BMDC分化过程中加入不同浓度的rmIL-17A,能够上调LPS刺激的BMDC共刺激分子CD80、CD86和MHC Ⅱ的的表达及细胞因子IL-12p40和IL-10的分泌,提示BMDC诱导分化过程中加入IL-17A促进LPS刺激的BMDC的成熟。结论一定剂量的GM-CSF能够诱导骨髓来源的单个核细胞分化为DC,LPS能够刺激GM-CSF诱导分化BMDC的成熟。成功建立了小鼠BMDC体外扩增模型,为研究IL-17A对BMDC的影响提供了实验基础。IL-17A能够促进GM-CSF诱导的BMDC前体表面共刺激分子的表达,对BMDC前体表型的发展有促进作用,并且具有一定的剂量依赖性；IL-17A不能促进充分分化的BMDC表面分子的表达及细胞因子的分泌,即IL-17A对充分分化的BMDC的成熟无影响；BMDC诱导分化过程中加入IL-17A能够促进LPS刺激的BMDC的成熟。