红豆越橘对神经细胞损伤及模拟军事应激小鼠的防护作用

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浆果和松科植物富含多种生物活性成分,具有抗氧化、抗肿瘤、免疫增强等多种功能作用。本文选取数种浆果和松科植物红松作为研究对象,研究其生物活性提取物质的体外抗氧化活性、对氧化诱导PC-12细胞(模拟神经细胞)和脑细胞损伤的保护作用,筛选出神经保护作用最强的红豆越橘,并对其主要成分进行鉴定;采用小鼠慢性应激刺激建立军事应激动物模型,验证红豆越橘对已建立模型的防护作用,此项研究工作对研发安全、天然有效的军事应激防护剂具有重要意义。本研究主要内容如下:选取红豆越橘、蓝靛果、花楸等几种浆果和红松为原料,采用60%乙醇超声辅助提取,以清除羟自由基和ABTS自由基的能力为指标,测定提取物体外抗氧化活性,从中筛选出抗氧化能力较强的原料:红豆越橘、蓝靛果、蓝莓和花楸;采用MTT法测定七种原料提取物提高过氧化氢诱导损伤的PC-12细胞和脑细胞存活率的作用,得出抑制PC-12细胞和脑细胞氧化损伤作用较强的原料:红豆越橘、山荆子和红松。综合分析比较七种植物活性提取物体外抗氧化活性及对PC-12和脑细胞氧化损伤保护作用的筛选结果,得出红豆越橘神经保护作用最强的结论。采用HPLC分析鉴定通过X-5大孔树脂富集的红豆越橘提取物,获得四种主要成分绿原酸、飞燕草、天竺葵素和矢车菊素,其含量分别为52.1898μg/mg、22.4422μg/mg、6.2933μg/mg、0.6989μg/mg,比例依次为75.8:32.1:1:0.1。建立模拟军事动物应激模型,考证红豆越橘对已建立动物(小鼠)模型的防护作用。采用小鼠连续灌胃红豆越橘提取物的方法,结果发现:红豆越橘对小鼠肝脏和脾脏等免疫器官具有不同程度的保护作用;能够提高小鼠脑组织SOD和GSH-Px活性;降低脑组织中脂质过氧化产物MDA的含量。结果表明红豆越橘可以通过提高脑组织的抗氧化酶活性抑制脑组织氧化损伤。另外,红豆越橘对模型小鼠糖皮质激素含量升高具有显著抑制作用,能够提高单胺类递质5-HT含量,并在一定程度上降低血乳酸和乙酰胆碱酯酶含量,由此获得红豆越橘对机体内相关激素水平具有调节作用,并可能与清除神经系统多余自由基相关的结论。通过红豆越橘对军事应激动物模型防护作用研究,验证了红豆越橘能够降低和缓解军事应激对情绪、认知及疲劳等不适造成的不良影响。
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