【摘 要】
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本文主要探讨了恶性胸水树突状细胞的获取方法;研究树突状细胞联合肿瘤浸润T淋巴细胞的体外抗癌作用;初步探讨树突状细胞治疗恶性胸水的可行性,为其临床应用提供实验依据。本文
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本文主要探讨了恶性胸水树突状细胞的获取方法;研究树突状细胞联合肿瘤浸润T淋巴细胞的体外抗癌作用;初步探讨树突状细胞治疗恶性胸水的可行性,为其临床应用提供实验依据。
本文选取2002年3月-2003年3月我院呼吸内科诊治的12名有明确病理诊断的恶性胸水患者。1. 密度梯度离心法获取胸水单个核细胞,HE染色法分析细胞成分。2. 活化胸水肿瘤浸润树突状细胞(TIDC)和肿瘤浸润T淋巴细胞(TIL):PEMCs经过两步贴壁获取非贴壁的TIDC和TIL,以小剂量IL-2活化14天。3. 诱导胸水单核细胞分化DC:PEMCs经过两步贴壁获取先贴壁的单核细胞,以GM-CSF与IL-4联合诱导14天。4. 细胞鉴定:S-100蛋白染色法和流式细胞仪分析鉴定TIDC和DC,SP法和流式细胞仪分析鉴定TIL。5. 体外抗癌作用:GLC-82肺癌细胞系TCA分别致敏TIDC、TIL和DC;TIDC活化TIL生成细胞毒性T淋巴细胞(CTL),DC与CTL混合培养24小时;CTL和混合细胞分别作为效应细胞杀伤GLC-82细胞;MTT法分别检测CTL及混合细胞在不同的效靶比对GLC-82细胞的特异性杀伤活性。
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