石油降解细菌的分离、筛选、鉴定及其对多环芳烃降解性能研究

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:pangpang925
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究从盘锦“红海滩”地区采集翅碱蓬及根系土壤,进行常规细菌分离,并采用柴油为唯一碳源的培养基从中筛选具有降油性能的菌株;对筛选到的菌株进行降油性能测定,研究其在不同作用时间(3d、5d、7d)内对柴油的原始降解率;选择在3个时间段降油性能均较高的菌株作为目的菌进行形态学观察、生理生化鉴定以及16S rDNA序列分析并测定其生长特性;选取降油效果较好的2株代表菌,以及实验室前期从辽宁盘锦沿海滩涂土壤分离的恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)Y3菌株,采用GC-MS法测定3株菌在添加不同浓度葡萄糖(0、0.5、1、1.5 g/L)作用7d后对萘、菲、惹烯、苯并[α]芘4种多环芳烃的降解性能;对3株菌的石油降解酶相关功能基因进行了扩增:结果显示:共分离纯化到28株细菌,其中具有降油性能的细菌7株,编号分别为S1、G3、G4、G9、G10、G11、G12;7株菌对柴油的原始降解率如下,3d分别为34.21%、3.68%、18.40%、18.95%、0.52%、9.47%、21.05%;5d分别为44.06%、3.19%、23.90%、24.70%、31.47%、25.90%、46.22%;7d分别为41.09%、1.49%、14.36%、28.22%、14.36%、29.70%、31.68%,其中S1、G11和G12菌株具有较高降油率;经鉴定S1菌株为微杆菌属(Microbacterium),与Microbacterium saperdate的同源性为98.7%;G11和G12皆属于刘志恒菌属(Zhihengliuella),与Zhihengliuella halotolerans的同源性为99.8%,3株菌最适生长温度范围皆为15℃~30℃,最适生长NaCl浓度分别为0%、2%和2%,最适pH分别为pH5、pH7和pH7;在4种多环芳烃(萘、菲、惹烯、苯并[α]芘)无机盐培养基中,自然降解率分别为5.49%、8.57%、7.52%、6.84%,在添加不同浓度的葡萄糖后,分别接种3株菌作用7d,对4种目标化合物的降解率均有不同程度的增加,其中对萘的降解率表现为,3株菌在无糖情况下的降解率差异不显著(P>0.05),1%浓度葡萄糖组降解率最高,Y3、G12、S1分别为70.56%、67.82%、57.46%,3株菌无显著性差异;对菲的降解情况为,1.5%浓度葡萄糖时3株菌降解效果在所有组中最高,与无糖组和0.5%糖浓度组差异显著(P<0.05),与1%浓度组差异不显著(P>0.05),3株菌间降解率差异不显著(P>0.05),Y3具有最高降解率,达到63.20%,其次为S1 60.90%,G12 60.33%;对惹烯的降解率为,无糖对照组,G12最高达到10.22%,其次为Y3和S1,降解率分别为:5.18%、0.05%,差异显著(P<0.05),各浓度组以1%葡萄糖时降解性能最佳,与无糖组和0.5%浓度组差异显著,与1.5%浓度组差异不显著,Y3降解率最高达到66.49%,其次为G12 66.42%、S1 66.18%,3株菌间降解率差异不明显(P>0.05);对苯并[α]芘的降解情况为,葡萄糖添加量1%时,3株菌的降解能力最强,与无糖组和0.5%糖浓度组差异极显著(P<0.01),与1.5%浓度组差异不显著(P>0.05),Y3降解率最高达到71.43%,其次为S1 71.91%,G12 70.50%,略低于S1;3株菌降解率仍无明显差异(P>0.05)。仅从S1菌株基因组上扩增得到了大小为691bp的烷烃羟化酶基因alkB部分的DNA片段,经NCBI blastx比对,结果与Rhodococcus qingshengii和Rhodococcus erythropolis的烷烃单加氧酶同源性高达98%。
其他文献
目的:探讨带线锚钉内固定治疗胫骨平台关节面后缘撕脱性骨折患者的护理方法。方法回顾性分析2008年1月至2012年1月,在桐乡市第二人民医院骨科治疗的15例胫骨平台关节面后缘撕脱
随着我国综合国力日渐增强,国民生产总值与人均可支配收入随之节节攀升,直接拉抬了民众的消费热情.同时,主要消费群体的年龄下限也在逐渐降低,高中生群体借由便捷的消费实践
为了快速响应市场,同时保持品牌风格的延续性,并在产品造型风格连续性和创新性之间取得平衡,提出了一种基于形状文法和交互式遗传算法的产品形态推演模型:针对品牌现有产品制
布达拉宫布达拉宫位于拉萨市的北玛布日山(红山)上,气势雄伟,巍峨壮丽,始建于公元7世纪,至今已有1300多年的历史,是西藏现存最大、最完整的古代宫堡建筑群。初为藏王松赞干布为文成公主所