稀土离子、药物及生物大分子相互作用的荧光特性研究及应用

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由于稀土荧光探针技术的独特优势,使其在药物分析及生物大分子分析方面有了很大发展。本论文利用稀土荧光探针技术建立了喹诺酮类药物及血清白蛋白新的测定方法,并以荧光光度法为研究手段,对药物与血清白蛋白的相互作用进行了研究,主要做了以下工作: (1) 以稀土离子中铕和铽为荧光探针,建立了一种简单而灵敏的测定痕量喹诺酮类药物的分析方法。这种方法是基于喹诺酮类药物能与稀土离子铕或铽形成络合物,发生分子内能量转移,并发射铕或铽离子强的特征荧光。据此建立了以铕或铽离子为荧光探针分析痕量喹诺酮类药物含量的新方法。利用该方法测定了药物制剂中喹诺酮类药物含量,检测限达到ng级。 由于生物样品具有很强的背景荧光,其荧光与药物的光谱发生重叠,常常干扰测定。本文采用的稀土离子荧光探针,能很好的避开生物样品中蛋白质荧光对喹诺酮类药物荧光的干扰,据此提出了不经预处理直接测定尿样中喹诺酮类药物含量的新方法。方法快速、简便、灵敏度高、选择性好,应用到实际样品的测定中,取得了满意的结果。 (2) 第二部分基于血清白蛋白对喹诺酮-铽络合物的荧光增强效应,建立了灵敏检测血清白蛋白的喹诺酮-铽络合物荧光探针。该探针具有高的灵敏度、选择性和低毒性,将其应用于血清样品中血清白蛋白含量的测定,结果令人满意。并探讨了其增敏机理。 (3) 利用荧光光谱法和紫外分光光度法研究了四环素类药物米诺环素与牛血清白蛋白的相互作用。用Stern-Volmer曲线求出了不同温度下的猝灭常数,讨论了猝灭机理,应用Farster型偶极-偶极非辐射能量转移机理,确定了药物与蛋白质的最近距离,并用同步荧光技术考察了米诺环素对BSA构象的影响。
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