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目的:观察中药加味补肝汤对链脲佐菌素致糖尿病周围神经病变大鼠背根节的保护作用,探讨加味补肝汤干预糖尿病周围神经病变的部分作用机制。
方法:①选用健康雄性Wistar大鼠40只。随机抽取10R大鼠为正常对照组,给予等体积的枸橼酸缓冲液一次性腹腔注射。其余30只大鼠禁食12h后腹腔内1次注射1%链脲佐菌素溶液50mg/kg,72h后血糖浓度大于16.7mmol/L者确定为糖尿病模型造模成功。随机其分为3组:模型组、加味补肝汤组、牛磺酸组,每组10只。造模稳定l周后,加味补肝汤组应用加味补肝汤治疗,按27.2g/kg灌胃,1次/d,连续8周。模型组及正常对照组大鼠自由进食水,牛磺酸组饮含1%牛磺酸的蒸馏水。②测量各组大鼠的体重及血糖;于4周、8周末进行神经电生理检测;应用计算机图像处理分析技术对免疫组化结果进行定量分析,通过Motic Images Advanced彩色图形处理分析系统,测定免疫反应产物p38丝裂素活化蛋白激酶的灰度值,免疫组化产物染色越深,灰度值就越小,抗原物质的含量就越高,表达强度越高;采用免疫组化方法检测各组大鼠背根节内p38MAPK(p38丝裂素活化蛋白激酶)表达;化学比色法测定血清MDA(丙二醛)含量。③计量资料差异比较采用t检验。
结果:整个观察过程中,正常对照组无动物死亡,牛磺酸组死亡1只,加味补肝汤组、模型组各死亡2只,最终进入结果分析正常对照组10只,牛磺酸组9只,加味补肝汤组和模型组各8只。①加味补肝汤组及牛磺酸组血糖无明显下降、体重较正常组增加缓慢,与正常大鼠比较有显著差异性(P<0.05);而模型组,牛磺酸组,加味补肝汤组两两组间对比,各项指标无显著差异性(P>0.05)。②坐骨神经传导速度明显减低,各组与正常对照组大鼠比较有显著差异性(P<0.05、P<0.01);而牛磺酸组,加味补肝汤组同模型组对比,也有显著差异性(P<0.05,P<0.01)。③大鼠背根节内p38MAPK表达强度及血清MDA水平:模型组明显高于正常对照组(P<0.01),加味补肝汤及牛磺酸组低于模型组(P<0.05、P<0.01)。
结论:①中药加味补肝汤能明显改善糖尿病周围神经病变神经传导速度。②糖尿病大鼠背根神经节组织p38MAPK表达增多、血清MDA含量增加可能为糖尿病周围神经病变早期病变的机制之一。③中药加味补肝汤能降低糖尿病大鼠背根神经节组织p38MAPK表达、降低血清MDA含量,可能为加味补肝汤防治糖尿病周围神经病变的部分作用机制。