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[目的]研究推拿干预对坐骨神经夹持损伤大鼠行为学、形态学、微管相关蛋白2(MAP-2)、神经丝蛋白M(NF-M)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)、Rho激酶Ⅱ(ROCKII)的影响,从神经元细胞骨架蛋白角度,揭示推拿在周围神经损伤修复过程中的作用机制。[方法]本实验以坐骨神经损伤为例研究周围神经损伤,以SD大鼠为实验动物,将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、模型对照组和推拿组。模型组、模型对照组和推拿组大鼠制备坐骨神经夹持损伤模型,模型对照组大鼠给予布袋束缚,推拿组在造模后7天开始选取患侧“殷门”、“承山”、“阳陵泉”穴,采用推拿手法模拟仪模拟点法、拨法、揉法进行干预,每日1次,每10次休息1天,共治疗20次。行为学主要采用斜板实验、光热耐痛阈实验的检测,考察坐骨神经损伤大鼠经推拿手法干预后运动和感觉功能恢复情况；形态学主要采用大鼠脊髓、坐骨神经HE染色,考察推拿手法干预后神经再生修复程度；通过大鼠腓肠肌湿重的测量和腓肠肌恢复率的计算,评价推拿干预后靶组织恢复情况；通过检测坐骨神经和脊髓中MAP-2、NF-M、MAG、ROCKII的变化,探究推拿对周围神经损伤再生修复作用机制。[结果]行为学结果显示,①斜板实验：造模7天后模型组斜板实验评分低于正常组和假手术组有显著性差异(P<0.05),说明坐骨神经损伤后,大鼠失神经支配区肌力降低,模型成功。推拿手法干预10次后,推拿组斜板试验评分高于模型组、模型对照组,有显著性差异(P<0.05),推拿手法干预20次后,推拿组斜板试验评分接近正常组水平,与正常组相比无显著性差异(P>0.05),与模型组、模型对照组比较有显著性差异(P<0.05),说明推拿能改善神经损伤后大鼠下肢肌力的恢复。②光热耐痛阈实验：造模7天后模型组光热耐痛阈值高于正常组和假手术组有显著性差异(P<0.05),说明坐骨神经损伤后,神经纤维的连续性受到破坏,靶组织的痛觉传导出现障碍。推拿手法干预10次、20次后,推拿组光热耐痛阈值低于模型组、模型对照组有显著性差异(P<0.05),说明推拿可促进神经损伤后感觉功能的恢复。形态学观察,①坐骨神经HE染色：正常组雪旺细胞排列整齐,结构完整；假手术组与正常组相似；模型组神经纤维散乱,轴索崩解,髓鞘与轴索形成卵圆体,雪旺细胞增殖；模型对照组与模型组相似；推拿组神经纤维排列较整齐,轴索清晰,雪旺细胞基本正常。②脊髓HE染色：正常组脊髓腹角神经元细胞核居中,核仁清晰,神经细胞排列整齐,尼氏体分布均匀；假手术组与正常组相似；模型组细胞出现肿胀、变性,神经元数量减少,排列不规则,尼氏体溶解消失；模型对照组与模型组具有相似的损伤表现；推拿组大部分神经元呈现正常形态,排列较规则,神经元变性、损伤程度较轻。③腓肠肌湿重结果：造模7天后,模型组大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率低于正常组和假手术组(P<0.05),说明坐骨神经损伤后神经纤维与腓肠肌的联系遭到破坏,腓肠肌发生退变、萎缩。推拿干预10次后,推拿组大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率高于模型组、模型对照组有显著性差异(P<0.05),与正常组相比有显著性差异(P<0.05)。推拿干预20次后,推拿组大鼠患侧腓肠肌湿重和恢复率仍高于模型组、模型对照组有显著性差异(P<0.05),说明推拿促进损伤神经再生,在一定程度上阻止或逆转腓肠肌萎缩。机理研究,①MAP-2免疫组化结果：造模7天后,模型组大鼠坐骨神经、脊髓中MAP-2积分光密度高于正常组和假手术组(P<0.05),说明大鼠坐骨神经损伤后机体自然修复过程中MAP-2可应激性的表达。正常组与假手术组之间无明显差异(P>0.05),说明坐骨神经未损伤时,其神经元结构和功能未受到破坏,不会引起MAP-2的变化。推拿干预10次及20次后,推拿组坐骨神经、脊髓中MAP-2积分光密度明显高于模型组和模型对照组(P<0.05),表明推拿可促进促MAP-2在坐骨神经、脊髓中表达；模型对照组与模型组之间无明显差异(P>0.05),说明布袋束缚不会引起机体MAP-2表达的变化。ONF-M免疫组化结果：造模7天后,模型组大鼠坐骨神经、脊髓中NF-M积分光密度高于正常组和假手术组(P<0.05),正常组与假手术组之间无差异(P>0.05),推拿干预10次及20次后,推拿组坐骨神经、脊髓中NF-M积分光密度明显高于模型组和模型对照组(P<0.05),表明推拿可促进促NF-M在坐骨神经、脊髓中表达；模型组与模型对照组之间无明显差异(P>0.05)。③MAG免疫组化结果：造模7天后,模型组脊髓中MAG积分光密度高于正常组和假手术组(P<0.05),正常组与假手术组之间无差异(P>0.05)。推拿干预10次及20次后,推拿组脊髓中MAG积分光密度明显低于模型组和模型对照组(P<0.05),表明推拿可抑制MAG在脊髓中表达,模型组与模型对照组之间无差异(P>0.05)。④ROCKII免疫组化结果：造模7天后,模型组脊髓中ROCKII积分光密度高于正常组和假手术组(P<0.05),正常组与假手术组之间无差异(P>0.05)。推拿干预10次及20次后,推拿组脊髓中ROCKII积分光密度明显低于模型组和模型对照组(P<0.05),表明推拿可抑制ROCKII在脊髓中表达；模型对照组与模型组之间无明显差异(P>0.05),说明布袋束缚不会对坐骨神经损伤大鼠ROCKII的表达产生影响。[结论]1推拿可促进坐骨神经损伤大鼠神经损伤后的修复,重新与靶组织建立联系,提高腓肠肌肌力和恢复率,并且提升痛觉敏感度,从而促进神经损伤大鼠感觉和运动功能的恢复。2推拿能够提高坐骨神经损伤大鼠脊髓和坐骨神经中神经元细胞骨架蛋白MAP-2、NF-M的表达,维持神经元细胞骨架完整性,促进受损神经元内部结构和功能的恢复,从而保护神经元,起到促进轴突再生的作用。3推拿能够降低坐骨神经损伤大鼠脊髓中轴突生长抑制因子MAG、ROCKII的表达,抑制微管与神经丝解聚,维护神经元细胞骨架结构稳定,促进神经元的存活,从而起到促进神经再生修复的作用。4推拿治疗周围神经损伤机理之一是通过调控轴突生长抑制因子,促进神经元细胞骨架蛋白的合成,从而起到保护神经元,促进受损神经再生修复。