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目的:通过检测不同临床类型乙型肝炎病毒(HBV)感染者外周血中效应性T细胞:Th17细胞、CD8+CD28+细胞,以及免疫抑制性T细胞:Treg细胞、CD8+CD28-T细胞,研究其介导的免疫作用与HBV感染后肝脏损伤的关系。 方法:收集24例乙型肝炎病毒携带者(Asymptomatic hepatitis B virus carrier,ASC)、30例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis Bpatient,CHB)患者、13例肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者外周全血及健康对照者30例。采用流式细胞术检测其Th17细胞、CD8+CD28+细胞、Treg细胞和CD8+CD28-T细胞;实时荧光定量PCR检测HBV DNA拷贝数;全自动生化仪检测ALT、AST。检测结果采用多因素方差分析,相关性比较采用Pearson相关性检验进行统计学分析。 结果:1、Thl7(T help17 cells)细胞:与健康对照组Thl7细胞比较,ASC组略有升高,但差异无统计学意义。CHB、HCC组Thl7细胞较健康对照组均有显著升高,且HCC组高于CHB组。Th17细胞与HBV DNA水平、ALT、AST均具有正相关性。 2、CD4+CD25CD127low调节性 T淋巴细胞(regu1atory T cells,Treg):与健康对照组 Treg细胞相比,ASC组略有升高,但差异无统计学意义;CHB组和HCC组Treg细胞较健康对照组均有显著升高,且HCC组较CHB组升高更显著。Treg细胞与HBV DNA水平、ALT、AST均具有正相关性。 3、Thl7细胞与Treg细胞呈正相关性。健康对照组Th17/Treg最低,与健康对照组比较,ASC组略有上升,但差异无统计学意义;CHB组较健康对照组升高,差异有统计学意义;HCC组较健康对照组升高,差异有统计学意义。HCC组较ASC组显著升高,差异有统计学意义。HCC组较CHB组升高,差异有统计学意义。 4、CD8+CD28+细胞:与健康对照组CD8+CD28+细胞相比,ASC组、不使用拉米夫定(Lamivudine,LAM)CHB组(CHB组)、HCC组均显著降低差异有统计学意义;使用拉米夫定 CHB组(CHB(LAM)组)与健康对照组差异无统计学意义但较其他HBV感染组升高。患者体内CD8+CD28+T细胞与HBV DNA水平、ALT、AST均具有负相关性。 5、CD8+CD28-细胞:与健康对照组CD8+CD28-细胞相比,ASC组升高,差异有统计学意义; CHB组和HCC组较健康对照组显著升高。CHB(LAM)组与健康对照组差异无统计学意义但较其他HBV感染组升高。患者体内CD8+CD28-T细胞与HBV DNA水平、ALT、AST均具有正相关性。 6、健康对照组CD8+CD28+/CD8+CD28-比率最高,与健康对照组比较,ASC组略有下降,但差异无统计学意义;CHB组较健康对照组降低,差异有统计学意义;HCC组较健康对照组降低,差异有统计学意义; CHB(LMA)组较健康对照组略有下降,但差异无统计学意义。HCC组较ASC组降低,差异有统计学意义;CHB(LMA)组较ASC组略有上升,但差异无统计学意义。HCC组较CHB组降低,差异无统计学意义CHB(LMA)组较CHB组上升,差异有统计学意义。 实验结论:1、HBV感染后随着疾病的发生发展,Thl7细胞、Treg细胞增多。由Thl7细胞、Treg细胞构成的网络平衡打破,趋向Thl7细胞所介导的炎症反应,引起肝细胞炎症损害。通过监测HBV感染者外周血Thl7细胞、Treg细胞可反映机体免疫状况。 2、HBV感染后随着疾病的发生发展,CD8+CD28-细胞/CD8+CD28+细胞比例升高,平衡趋向于CD8+CD28-细胞所介导的免疫抑制,由CD8+CD28+细胞介导的免疫杀伤效应减弱,导致疾病的迁延不逾。