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细菌基因组DNA和人工合成的含有未甲基化“CpG”motif的特定寡核苷酸序列（统称为CpG DNA或免疫刺激序列ISS）能够直接或间接刺激人和小鼠等多种高等动物的B淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等抗原递呈细胞以及天然杀伤细胞的活化或增殖,是一种具有广泛作用的免疫激活剂。近年来的研究表明,含有ISS序列的细菌或病毒基因组DNA和质粒DNA在体外也能增强鱼类的先天免疫应答,如能产生有抗病毒作用的细胞因子,能增强鱼体抗体的应答能力等。但到目前为止,关于细菌基因组DNA在鱼体体内的免疫调节作用,尚未见有相关文献的报道,这一领域的工作尚处于起步的阶段。 在本实验中,我们选取了富含免疫刺激序列的Ecoli基因组DNA,通过注射和口服途径来研究其对鲫鱼免疫活性的体内调节作用。重点研究了Ecoli基因组DNA对外周血各种白细胞的数量、血清溶菌酶的活性及血清杀菌力的调节作用。 实验中,我们发现注射10、20、40μg fish-1Ecoli基因组DNA 3d后,均能增强鲫鱼的免疫活性,外周血白细胞总数,嗜中性粒细胞数均有所增加,溶菌酶活性,血清杀菌力也均所有增强。其中注射lOμg fish-1Ecoli基因组.DNA时效果最为明显,但随着剂量的进一步增加,并不继续增强其作用。进一步的实验结果显示,鲫鱼注射lOμg fish-1 Ecoli基因组DNA,3d后白细胞总数和嗜中性粒细胞数量丌始增加,溶菌酶活性,血清杀菌力丌始出现显著增强;6d后淋巴细胞丌始增加;各个指标的增强效果均可持续至9d,但到30d时,均回落至对照组的水平。 当采用口服途径处理鲫鱼时,实验结果显示,口服5～40μg fish-1Ecoli基因组DNA,口服一次,3d后,则各种免疫指标与对照组相比,均没有显著差异。而进一步的实验结果显示,口服一周,每天口服20μg fish-1 Ecoli基因组DNA的鲫鱼,在停止服用Ecoli基因组DNA 3d时,白细胞总数和嗜中性粒细胞数,淋巴细胞数均明显增加（p<0.01）,溶菌酶活性,血清杀菌力也出现极显著增强;7d时,各种细胞数量均有所回落,淋巴细胞数量与对照组相比,已没有显著差异,但白细胞总数和嗜中性粒细胞数,溶菌酶活性,血清杀菌力与对照组相比,仍有显著增加。综上所述,细菌基因组DNA不仅在体外能增强鱼类的先天免疫应答,本实验也首次证实了其在鱼体体内具有同样的免疫增强作用。