前言 疟疾是疟原虫通过媒介昆虫按蚊传播的严重威胁人类健康的寄生原虫感染性疾病。2005年《自然》杂志有一研究指出,截止到2002年,全球每年有大约5.15亿人感染疟疾,受疟疾威胁的人口数达22亿,是世界卫生组织1998年公布数字的两倍。由于耐药虫株和耐杀虫剂蚊的出现,疟疾的发病率和死亡率逐年上升,全球防疟形势面临严峻挑战。目前认为安全、廉价和有效的疟疾疫苗是控制乃至根除疟疾的重要途径,因此世界各国对疟疾疫苗的研制和开发给予了高度的关注和支持。 疟疾疫苗分三大类,子孢子疫苗、红内期疫苗和传播阻断疫苗(Transmission blocking vaccines,TBVs)。TBVs是通过诱导宿主产生特异的有性期蛋白抗体,阻断疟原虫的有性期发育,从而阻止媒介昆虫按蚊把疟原虫传播给人类。其最大的优势是具有有限的抗原多态性和较强的免疫原性,与药物或其它两类疟疾疫苗联合应用可防止耐药性原虫的扩散,个体接种后会使整个流行区人群受益。 Pvs25和Pvs28作为蚊阶段虫体合子和动合子表达的主要表面蛋白,是间日疟原虫传播阻断疫苗重要的候选抗原,对间日疟原虫在蚊胃内存活、黏附和穿透发挥至关重要的作用。尽管Pfs25和Pfs28基因突变有限,与其相比,Pvs25和Pvs28基因呈现明显多态。国外学者对孟加拉株和泰国株小样本报道显示,Pvs25有5个突变位点,Pvs28有22个突变位点。抗原多态性一直是疫苗研制的主要障碍。目前认为,多态性的研究是疟疾疫苗应用于流行区之前的首要课题。 我们前期实验表明疟疾中低度流行区湖北、浙江分离株Pvs25基因高度保守,湖北分离株Pvs28基因突变有限。本文预进一步研究疟疾中低度流行区浙江分离株Pvs28和高发区云南分离株Pvs25/28基因多态性,检测基因突变程度,比较不同流行区之间Pvs25/28突变程度,预测基因突变与