研究背景支气管哮喘(Bronchial asthma, asthma)是由多种细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症性疾病,它的基本特征是气道高反应性、气道重塑及气道阻塞。根据世界卫生组织2012年公布的数据,哮喘的全球发病率估计在4.3%左右。其他一些研究结果显示,不仅发达国家,发展中国家哮喘的发病率也在不断地上升。哮喘的发病机制非常复杂,但毫无疑问遗传因素在其发生发展中起到重要作用。伴随着基因组学和遗传学的发展,大量工作深入研究基因在哮喘中的作用,这其中有大部分研究试图阐明基因单核苷酸多态性与哮喘发病风险的相关性。到目前为止,研究人员发现许多哮喘的易感基因,这些基因的某些位点的单核苷酸多态性变异可能是哮喘的危险因素。其中,位于第5号染色体q31-q32的β2肾上腺素能受体基因和子宫珠蛋白相关蛋白1基因是两种重要的哮喘易感基因。在正常气道中,β2肾上腺素能受体发挥着多种重要的生理作用,比如扩张气道、增强纤毛清除功能,以及气道保护作用等。编码β2肾上腺素能受体的基因位于第5号染色体q31-q32,这个染色体区域与哮喘及相关表型密切相关。这个染色体区域有许多基因可以编码表达一些促炎症介质,比如白介素3,4,5等。许多研究探讨β2肾上腺素能受体基因多态性与哮喘发病危险的相关性。其中,一些研究发现β2肾上腺素能受体基因多态性在哮喘发病中起着关键作用,而另外一些研究并不支持这种观点。人类子宫珠蛋白相关蛋白1基因也位于第5号染色体q31-q32,它的信使RNA (mRNA)主要在肺脏组织中表达,特别是在肺的气道上皮细胞中有高水平的表达,并且可以编码表达子宫珠蛋白相关蛋白1。这种分泌蛋白的氨基酸序列与克拉拉细胞蛋白(Clara cell protein)的序列相类似。由于研究已知克拉拉细胞蛋白在人体中具有重要的免疫调节和抗炎反应,因而人们推测子宫珠蛋白相关蛋白1蛋白可能也具有类似的病理生理功能。关于子宫珠蛋白相关蛋白1基因单核苷酸多态性是否会增加哮喘发病风险的问题,已经发表的一些病例对照研究的结论并不一致。综上所述,到目前为止,β2肾上腺素能受体及子宫珠蛋白相关蛋白1基因单核苷酸多态性在哮喘发病的作用尚不十分确切,并且单个研究往往由于样本量小,以及统计学和临床异质性差异大,缺乏有效的统计学效能。因此,我们通过查阅大量文献,收集相关的数据,应用meta分析的方法,定性定量分析β2肾上腺素能受体、子宫珠蛋白相关蛋白1单核苷酸多态性在哮喘发病中作用。研究目的通过全面检索已发表文献,收集相关的数据,应用meta分析的方法定性定量分析β2肾上腺素能受体及子宫珠蛋白相关蛋白1基因多态性与支气管哮喘发病风险的关系。材料和方法按照系统评价和meta分析报告规范(PRISMA)的标准来完成本课题。首先制定出系统、全面的检索策略,采用主题词与自由词相结合的方式,所有检索策略通过多次预检索后确定。计算机检索MEDLlNE、EMBASE、BIOSIS Previews及EBSCO等数据库公开发表的原始文献、会议论文集等。全面收集2013年3月(UGRP1)、2014年1月(ARDB2)以前发表的有关β2肾上腺素能受体及子宫珠蛋白相关蛋白1基因单核苷酸多态性与哮喘发病风险相关的文献。严格按照预先制定的纳入/排除标准筛选合格文献,并由两名以上研究者独立提取数据。计算不同遗传模型下比值比(odds ratio, OR)和95%可信区间(confidence interval, CI)来评价β2肾上腺素能受体及子宫珠蛋白相关蛋白1基因单核苷酸多态性与哮喘发病风险的关联程度。使用Q检验和I2统计量进行异质性检验,根据异质性情况选择适当的效应模型进行数据合并。若各研究结果间无异质性,采用Mantel-Haenszel固定效应模型；否则采用DerSimoninan. Laird随机效应模型进行合并分析。根据人种、对照组过敏状态及年龄等进行亚组分析来探索异质性来源。用敏感性分析来评估结果的稳定性。通过绘制漏斗图定性观察联合Egger线性回归法定量检验来综合评估发表偏倚。所有的meta分析采用的是Endnote、RevMan5.2及Stata11.0软件。结果1.支气管哮喘与β2肾上腺素能受体基因单核苷酸多态性关系的Meta分析共纳入37个研究,包括6648例患者和15943例对照。所有研究对照组均符合哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinberg equilibrium, HWE)。1)、其中有29个研究探讨β2肾上腺素能受体基因Arg/Gly16多态性与哮喘发病风险的相关性。29个研究合并分析的结果显示,β2肾上腺素能受体基因Arg/Gly16多态性与哮喘风险的相关性有统计学意义：等位基因模型A vs G (OR=1.06,95%CI=1.01～1.12, p=0.02)、纯合子遗传模型AA vs. GG (OR=1.11,95%CI=1.02～1.21, p=0.02)。根据人种进行亚组分析发现,亚洲人群组有统计学意义：等位基因模型A vs. G (OR=1.14,95%CI=1.05～1.23, p=0.001)、纯合子模型AA vs. GG (OR=1.26,95%CI=1.12～1.43, p=0.0001)和显性遗传模型(OR=1.23,95%CI=1.06～1.44, p=0.008)。但是,高加索人群组并无有统计学意义发现。另外,根据年龄进行亚组分析,成人组和儿童组都无有统计学意义发现。2)、其中有22个研究探讨β2肾上腺素能受体基因Arg/Gly27多态性与哮喘发病风险的相关性。其中的一个研究显著影响异质性,因而在数据合并阶段没有纳入。其余的21篇文章的合并分析结果显示在所有的基因遗传模型中均无有统计学意义的发现。年龄分组显示,成人组有统计学意义的有：等位基因模型A vs. G(OR=1.10,95%CI=1.01～1.19, p=0.03)、纯合子模型(OR=1.20,95%CI=1.07～1.34, p=0.002)。但是,根据人种进行亚组分析,亚洲组和高加索组均无有统计学意义的发现。2.支气管哮喘与子宫珠蛋白相关蛋白1基因-112G/A多态性关系的Meta分析共纳入6个研究,包括816例患者和1165例对照。所有研究对照组均符合HWE。所有研究的合并分析结果显示子宫珠蛋白相关蛋白1基因-112G/A多态性与哮喘发病风险的相关性有统计学意义：纯合子模型AA vs. GG (OR1.76,95%CI=1.12～2.78, p=0.01)、隐性遗传模型AA vs. AG/GG (OR=1.70,95%CI=1.09～2.67, p=0.02)。基于人种亚组分析结果提示,亚洲组人群中-112G/A多态性与哮喘风险的相关性有统计学意义：等位基因模型A vs. G (OR=1.42,95%CI=1.06～1.90, p=0.02),纯合子模型AA vs. GG (OR=2.08,95%CI=1.16～3.72, p=0.02)、隐性遗传模型AA vs. GA/GG (OR=1.90,95%CI=1.07～3.38, p=0.02)。但是高加索人群亚组无有统计学意义发现。根据年龄进行亚组分析,成人组和儿童组均无有统计学意义的发现。结论1)、根据meta分析结果,β2肾上腺素能受体基因Arg/Gly16多态性可能增加亚洲人群的哮喘发病风险。β2肾上腺素能受体基因Gln/Glu27多态性可能增加成人的哮喘发病风险。2)、根据meta分析结果,子宫珠蛋白相关蛋白1基因-112G/A多态性可能可能增加亚洲人群的哮喘发病风险.3)、但是,由于本meta分析所纳入的各研究间存在一定的异质性,且由于原始资料的缺乏未能考虑到基因与基因及基因与环境等相互作用等局限性。因此,需要有更多的有明确诊断标准及严格质量控制的全基因组相关分析或者病例对照研究来进一步证实本研究的结果。