论文部分内容阅读
急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是临床常见危重疾病,发病机制尚未完全阐明,急性肺损伤(ALI)是ARDS的早期阶段,脂多糖(LPS)引起的脓毒症是引起ALI/ARDS的重要原因之一。药物治疗是ALI治疗的重要手段之一,但当前临床用于治疗ALI的药物均存在疗效不满意和／或不良反应严重等问题,因此,寻找新的ALI治疗药物是急需解决的难题。地昔帕明(DP)是一种选择性去甲肾上腺素重摄取抑制剂,是经典的三环类抗抑郁药,已被广泛用于治疗抑郁、慢性疼痛及其它神经精神疾病。有研究报道,DP可降低LPS休克的病死率,对LPS休克具有保护作用。但是目前DP对LPS急性肺损伤有何影响未见报道。目的：本研究旨在探讨地昔帕明对LPS引起的急性肺损伤的作用,并初步探讨其作用机制。方法：(1)建立小鼠LPS肺损伤模型,设NS组、LPS组、DP处理组和DP对照组四组。6h后处死收取标本；(2)测量肺湿重和干重的比值(W／D)并观察肺组织病理变化,以反映肺组织的损伤程度；(3)测定支气管肺泡灌洗液中蛋白和白细胞(WBC)含量,以反映支气管肺泡毛细血管通透性变化；(4)生化测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性和丙二醛(MDA)水平分别反映肺组织中性粒细胞的水平和氧化损伤的程度；(5)ELASA测定肺肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量反映细胞因子TNF-α的变化；(6)免疫组织化学染色法测定肺NF-κB p65的表达和分布反映NF-κB在肺中含量的变化。结果：(1)肺组织湿重／干重比值：与NS组比较,LPS组明显升高(p<0.01),与LPS组比较,DP处理组的肺湿干重比降低(p<0.05)。(2)与NS组比较,LPS组肺泡灌洗液的蛋白含量和WBC总数均明显增高(p<0.01)；DP处理组可降低LPS所引起的上述指标的升高(p<0.05)。DP组各指标则与NS组比较无显著性差异。(3)LPS组小鼠肺组织匀浆中MPO活性、MDA含量和TNF-α水平同NS组比较升高(p<0.01),DP处理后小鼠肺匀浆内MPO活性、MDA含量和TNF-α水平均较LPS组降低(p<0.05),DP对照组各指标与NS组比较无显著性差异。(4)病理变化：光镜下可见LPS组病理切片显示肺泡和间隙水肿明显,大量中性粒细胞浸润,肺间隔增厚,充血明显,DP处理后使肺损伤病理改变不同程度减轻,病理评分均显著低于LPS组(p<0.01),但仍高于NS组(p<0.01)。DP对照组和NS组相比无显著性差异。(5)NF-κB p65在NS组仅见少量散在的NF-κB p65阳性细胞,LPS组气道黏膜及肺组织中可见大量NF-κB p65表达呈强阳性的细胞,阳性细胞免疫反应产物的比例较DP处理组对比明显升高(p<0.05)。与NS组相比,LPS组和DP处理组NF-κB p65蛋白表达强度明显增强(p<0.05),DP处理组NF-κB p65蛋白表达强度较LPS组明显减轻(p<0.05)。结论：DP能降低LPS诱导小鼠ALI模型的肺组织TNF-α水平的升高,抑制NF-κB信号转导通路的活化,减轻肺组织中性粒细胞浸润程度,抑制毛细血管通透性的增高,减少蛋白渗出及肺水含量,从而减轻LPS急性肺损伤的程度。