木薯CIPK23与CBL1/9互作调节木薯对细菌性枯萎病抗性的研究

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木薯是世界三大薯类之一,广泛种植于热带和亚热带地区,是热带地区低收入人民的主要粮食作物。木薯细菌性枯萎病是危害木薯产量的一种严重病害。目前,我们所知道木薯抗病相关的基因报道很少,因此,发掘木薯抗病相关基因,对培育木薯抗病新品种和提高木薯产量有很大的意义。钙离子在植物生长发育和逆境胁迫应答方面发挥着重要作用,钙神经素B类似蛋白和与CBL的相互作用蛋白激酶CIPK是钙信号中关键的组成部分。在本研究中,我们做了木薯响应地毯草黄单胞菌时木薯CIPK家族25个MeCIPK基因的表达谱,从中选取了 7个MeCIPK基因做功能分析。再将这7个基因瞬时转化入烟草叶片,筛选出抗病相关基因进行功能分析,将筛选出的抗病基因与MeCBL1和MeCBL9用病毒诱导的基因沉默法在木薯中沉默,再用Xam侵染木薯检测木薯的抗病性变化。获得的主要结果如下:1.本实验检测了 25个MeCIPK基因响应Xam的表达谱,从25个MeCIPK基因中选取 7 个 MeCIPK基因(MeCIPK5,MeCIPK8,MeCIPK12,MeCIPK22,MeCIPK2 和MeCIPK224)功能分析。将筛选出的7个MeCIPK基因连接入pEGAD载体,通过农杆菌介导法瞬时转化入烟草叶片,将注射过农杆菌部位的叶片在共聚焦显微镜下观察其亚细胞定位,发现这7个基因都定位于细胞核和细胞膜。2.将7个MeCIPK基因瞬时转化入烟草后,发现其能影响烟草体内抗病相关基因的表达,并且都能引发注射部位烟草叶片的胼胝体沉积,除了MeCIPK7 其他6个都对Xam有抑制作用。3.通过酵母双杂交和BiFC证明MeCIPK23分别和MeCBL1和MeCBL9都可以相互作用。在烟草中过表达MeCBL1和MeCBL9,发现他们可以提高烟草的防御能力,相反,在木薯中抑制MeCIPK23、MeCBL1和MeCBL9,有同样的效果。综上所述,我们发现在木薯中MeCIPK23与MeCBL1和MeCBL9都可高木薯对Xam的抗病性的,该实验结果为培育木薯抗病新品种提供了潜在基因。
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