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截瘫是胸腹主动脉手术后严重的并发症,手术过程中阻断主动脉所致的脊髓缺血被认为是造成神经功能障碍的主要原因。兴奋性氨基酸、细胞内钙离子聚集以及氧自由基的过量产生等已被证实参与脊髓缺血性损伤。因此,人们对低温、NMDA受体拮抗剂、钙通道阻滞剂及自由基清除剂的保护作用等进行了大量的研究,但其临床效果远不理想。电针(Electroacupuncture)技术是传统针灸在现代电子技术基础上的发展,已在脊髓疾病治疗中获广泛应用,取得了良好的临床效果。本文旨在探讨电针刺激特定穴位预处理对兔脊髓缺血/再灌注损伤的保护作用,为其临床应用提供理论依据。 目的 1.探索重复电针刺激足三里穴预处理对脊髓缺血性损伤的保护作用。 2.研究重复电针刺激足三里穴对脊髓缺血性损伤保护作用的部分机理。 第四旱医大学硕士学位论文 方 法 1.重复电针刺激足三里穴对兔脊髓缺血/再灌注损伤保护作用 24只成年雄性新西兰大白兔,随机分成三组(各组n—8),即对照组、戊巴比妥组及电针预处理组。对照组每天静脉注射等容量生理盐水,连续5天;戊巴比妥组每天静脉注射戊巴比妥 30mg/kg,连续 5天;电针预处理组每天静脉注射戊巴比妥30mg/kg,同时给予电针刺激足三里穴(疏密波,频率2/l SHz,1llLA),30min/d连续5天。采用肾下主动脉门)阻断法造成脊髓缺血p0min*再灌注模型,观察再灌注后 4、8、12、24和 48h年经功能评分(neurologic unction score,NFS),并于 48 h观察神经功能评分后处死动物取脊髓(LS-7)制作标本行病理组织学观察。 2.重复电针刺激足三里穴对脊髓缺血/再灌注损伤生化指标的影响 20只成年雄性新西兰大白兔,随机分成两组(各组 n—10),即对照组、电针预处理组。对照组未行任何处理:电针预处理组每天静脉注射戊巴比妥30mg/kg,同时给予电针刺激足三里穴(疏密波,频率2/15Hi,lmA人30min/d,连续5天。采用肾下主动脉O趴)阻断法造成脊髓缺血O0min)/再灌注模型,分别于缺血前厂。),缺血 20mina;杆再灌注 lhK。)三个时间点抽取股动脉血,采用黄瞟吟氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)和硫代巳比妥酸法测定丙H醛(MDA卜观察SOD、MDA的变化 3.重复电针刺激足三里穴对脊髓缺血/再灌注损伤后HSP90表达的影响 16只成年雄性新西兰大白兔,随机分成两组(各组 n=8),即对照组和电针预处理组,对照组未行任何处理;电针预处理组每天静脉注射戊巴比妥 30mg/kg,同时给予电针刺激足三里穴(疏密波,频率 2八,lha*30min/d,连续5天。采用肾下主动脉ORA)阻断法造成脊髓缺血*0min)/再灌注模型,观察再灌注后48h脊髓HSP90表达。 二 第四军医大学顶士学位论文 结 果 1.重复电针刺激足三里穴对脊髓缺血/再灌注损伤具有保护作用 再灌注48h电针预处理组的后肢运动功能评分明显高于对照组和戊巴比妥组…叩.01入 脊髓前角正常运动神经元细胞数明显多于对照组和戊巴比妥组o吻刀1),戊巴比妥组与对照组之间无显著差异。 2.重复电针刺激足三里穴对脊髓缺血l再灌注损伤后生化指标的影响 缺血及再灌注后,对照组血浆SOD活性较缺血前明显降低(P<0.05);电针组血浆SOD活性较缺血前变化不明显,但与对照组相比,却明显升高 (R0.05)。缺血及再灌注后,各组血浆N加含量均较缺血前升高;但在再灌注后,电针组与对照组相比,电针组MDA含量明显降低(P<0刀5)。 3.重复电针刺激足三里穴对脊髓缺血/再灌注损伤后HSP90表达的影响 再灌注48h脊髓前角的HSP90表达量电针预处理组明显多于对照组 (p<0刀5)。 结 论1.重复电针刺激足三里穴对脊髓缺血/再灌注损伤有明显的保护作用。2.重复电针刺激足三里穴行预处理诱导缺血耐受的机理可能与消除氧自 由基,抑制脂质过氧化及增强HSP90在脊髓前角的表达相关。