采用单因素分析和正交实验相结合的方法对黄芩苷脂质体制备工艺进行初步研究,选取类脂比(胆固醇与豆磷脂的比例),药载比(豆磷脂与黄芩苷比例),水化时间,粉碎超声时间,以黄芩苷脂质体包封率和粒径作为评价指标,根据实验可行度得出最佳处方是采用甲醇溶解的黄芩苷溶液与成膜溶剂一起旋转蒸发的薄膜分散法,类脂比1:2,药载比1:4,水化时间15min,粉碎超声时间15min。包封率测定采取Sephadex G-50填充微柱离心法,此法简单经济,可行性高。制备所得黄芩苷长循环免疫脂质体,测定其粒径与电位符合要求,制备三批黄芩苷长循环脂质体粒径范围:批号20150527,粒径126nm±0.12,PDI平均值为0.286;批号20150603,粒径118nm±0.16,PDI平均值为0.279;批号20150530粒径为139nm±0.09。PDI平均值为0.267。电位范围是-25-15mv.高效液相测定黄芩苷免疫脂质体的离心液峰面积并绘制流出曲线,脂质体峰与游离黄芩苷药物峰分离界限明显,平均包封率为27.5%。扫描电镜观测得其形态,利用荧光显微镜观察到单抗偶联到脂质体上发出荧光。MTT实验结果分析可知,(1)不管是黄芩苷组,普通脂质体组和长循环脂质体组,还是免疫脂质体组,对HepG2细胞的毒性呈现时间正相关性。(2)脂质体制剂的形式对药物释放具有缓释作用。(3)脂质体表面修饰的转铁蛋白受体单克隆抗体能有效结合HepG2,免疫脂质体对细胞的毒性优于长循环脂质体。黄芩苷长循环免疫脂质体的靶向性的验证:第一是结合情况(定性分析):荧光显微镜比较投药时间60min后,荧光显示结果:抗体组可见清晰明显的荧光,长循环脂质体组中不能见到清晰明显荧光,黄芩苷长循环免疫脂质体组可见大量清晰的荧光表明,制得的黄芩苷长循环免疫脂质体能与人肝癌细胞结合发出大量明显清晰的荧光。第二是阳性结合率(定量分析):利用流式细胞仪检测加入不同制剂的细胞经过相同的培养时间60min后的荧光阳性率。第一次黄芩苷长循环免疫脂质体荧光阳性率是51%;第二次黄芩苷长循环免疫脂质体荧光阳性率42%,表明黄芩苷长循环免疫脂质体与HepG2细胞确实实现了有效结合。