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研究背景和目的 局灶脑缺血后半暗带的存在为脑梗塞的治疗指出了希望。动物实验发现早期恢复血流能缩小梗塞范围。目前对半暗带的研究多是从代谢、血流、和电活动等方面进行。我们利用线栓法模型对局灶脑缺血／再灌注后半暗带和缺血中心区神经元和胶质细胞以及生长因子表达在不同时间和不同部位的变化从组织病理的多方面进行了研究。 实验设计和观察指标 分两大部分，一、半暗带病理显示方法研究：雄性Wistar大鼠42只，随机分为7组：正常对照、假手术、O2R0、O2R0.5、O2R2、O2R4、O2R24、每组各6只动物．缺血再灌注模型制作后分别于不同时间处死动物，经过特殊灌注固定及特殊染色观察早期缺血中心区，并与普通染色方法比较，由此找出半暗带的病理辨认标准。二、局灶脑缺血／再灌注后半暗带和缺血中心区的系列观察：雄性Wistar大鼠72只，随机分成12组：正常对照、假手术、O2R0、O2R0.5、O2R2、O2R4、O2R8、O2R24、O2R48、O2R96、O24R0、和O4R24各组，每组6只动物，分别在模型制作结束后相应时间处死，制作普通光电镜病理切片，观察半暗带和缺血中心区的范围、脑梗塞的范围，半暗带和缺血中心区内神经元、小胶质细胞和星形胶质细胞的各种病理变化，半暗带和缺血中心区的细胞凋亡情况，TGF β在半暗带和缺血中心区的表达情况 实验方法 动物模型制作采用线栓法；早期缺血中心区和黑色神经元的显示采用嗜银三步染色；普通病理技术包括石蜡切片、HE、TB、LFB染色、半薄和超薄切片、铅铀染色；小胶质细胞用凝集素组化显示；星形胶质细胞用GFAP免疫组化显示；TGF β表达用免疫组化显示，半暗带、缺血中心区和脑梗塞范围测量以及细胞计数使用图像分析技术；细胞凋亡用TUNEL、Hoechst 33342显示并结合电镜观察证实。数据分析用SPSS统计软件，采用方差分析。 实验结果 ①线栓法动物模型在大鼠能产生稳定的梗塞，脑梗塞面积在再灌注24小时达最大，再灌注48和96小时脑梗塞进一步成熟，梗塞面积不变。该类脑梗塞模型的再灌注时间窗在4小时以前。②嗜银三步染色能选择性显示局灶