论文部分内容阅读
已知虫草属中不少种类具有显著的生物活性,部分种类药用历史悠久。目前已有的研究主要集中在药理作用、生物学、资源等方面,而对其活性相关的化学成分研究不够系统深入,大多是与冬虫夏草进行简单的营养成分比较,且研究对象主要是冬虫夏草、蛹虫草等少数种。广东虫草(Cordyceps guangdongensis)是近年发现的广东特有的虫草新种,前期研究表明其具有良好的药理活性。本文以广东虫草为研究对象,比较其子实体和发酵物的粗提物的体外细胞毒活性,并利用色谱法对其活性部位的化学成分进行了系统分离,且通过气质联用(GC-MS)技术分析比较了低极性部位脂肪酸的组成,取得以下进展:
1、利用MTT法比较广东虫草栽培子实体、发酵菌丝体和菌液的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水相萃取物的体外细胞毒活性。结果显示仅发酵菌液的正丁醇萃取物对人肝癌细胞7402有抑制作用,其在500μg/mL和250μg/mL浓度下72h时,抑制率达19.7％和13.5％,而其他样品均无抑制作用；而对于人宫颈癌Hela细胞,各萃取物均有一定的抑制作用,其中发酵菌液的石油醚、正丁醇相萃取物在500μg/mL浓度下72h时,抑制率达49.7％和53.4％,作用效果与阳性对照接近；各萃取物对人正常肝细胞(L02)的作用效果与阴性对照接近,无明显毒性。
2、对广东虫草子实体的石油醚和乙酸乙酯部位,发酵物(菌丝体和发酵菌液)的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇部位的化学成分进行系统的分离纯化,得到多个单体化合物。经波谱鉴定出8个化合物:6-O-methylnorrubrofusarin(1)、麦角甾醇(2)、脑苷酯B(3)、脑苷酯A(4)、pidodic acid mythl ester(5)、glucosylisomaltol(6)、正丁醇β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、尿嘧啶(8)。其中化合物1、4-7为首次从虫草中分离到。
3、利用GC-MS分析比较广东虫草栽培子实体,发酵菌丝体和菌液的脂肪酸组成,结果表明:广东虫草的脂肪酸主要为亚油酸、油酸和棕榈酸,与传统中药冬虫夏草的脂肪酸组成基本一致；其子实体和菌液均以不饱和脂肪酸为主,且亚油酸含量达60％以上；而菌丝体以饱和脂肪酸为主,亚油酸含量相对较低,不足30％。