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苏云金芽孢杆菌(Bt)是目前世界上用途最广、产量最大的微生物杀虫剂。小菜蛾是世界性分布的重要农业害虫,目前,小菜蛾也是唯一在田间对Bt产生抗性的害虫。调查田间小菜蛾对Bt的抗性水平,研究小菜蛾对Bt的抗性机理对于治理小菜蛾等害虫抗性的发展,保持Bt制剂和Bt作物的在控制害虫方面的长期有效性有重要意义。因此,为了解小菜蛾田间抗性状况,本文调查了广东、福建、浙江和江苏四省田间小菜蛾种群对Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry2Aa和Bt制剂的抗性情况。为研究小菜蛾的抗性机理,筛选了对Cry1Ac活化毒素有1178倍抗性的小菜蛾品系,测定了对Cry1Aa、Cry1Ab、Cry2Aa和Bt制剂的交互抗性,研究了抗性品系对Cry1Ac活化毒素的抗性遗传方式,比较了抗性品系与敏感品系中肠受体与毒素结合能力的差别。
1.田间小菜蛾对Bt的抗性监测
结果表明广东小菜蛾种群对Bt的抗性最高,对Cry1Ab、Cry1Ac和Bt制剂达到中高抗水平;福建小菜蛾种群对Cry1Ab、Cry1Ac和Bt制剂达到中等水平抗性;浙江和江苏田间小菜蛾对Bt毒素和制剂目前处于低水平抗性阶段。
2.小菜蛾对Cry1Ac活化毒素的抗性筛选及交互抗性研究
结果表明PSBT品系对Cry1Ab和Cry1Aa活化毒素有明显的交互抗性,对Bt制剂有一定的交互抗性,而对Cry2Aa毒素没有明显的交互抗性。
3.小菜蛾PSBT抗性品系对Cry1Ac活化毒素的抗性遗传方式
表明抗性遗传为常染色体遗传。小菜蛾PBST品系对Cry1Ac活化毒素的抗性可能为单基因遗传。
4.小菜蛾中肠BBMV与Cry1Ac毒素结合的研究
制备了PHI-S、PSBT和PS三个小菜蛾品系的中肠BBMV受体,测定了Cry1Ac毒素与BBMV的饱和结合能力,研究发现PS小菜蛾田间品系与PHI-S敏感品系相比,其受体的结合能力有一定程度的下降,而PSBT抗性品系的受体已基本丧失了结合毒素的能力。同时研究发现PHI-S和PS品系的BBMV受体都可与Cry1Ac可逆性结合,竞争结合曲线表明小菜蛾具有单一受体结合位点,而PSBT抗性品系BBMV丧失了可逆性结合能力。