抗人心肌肌钙蛋白I单抗制备及酶免疫检测方法的建立

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目的:利用已纯化的人心肌肌钙蛋白I制备单克隆抗体;建立心肌肌钙蛋白I胶体金免 疫层析快速定性检测法,并初步应用于临床心肌梗塞患者血心肌肌钙蛋白I的检测.方法:1.单克隆抗体的制备及鉴定;2.单克隆抗体腹水的纯化;3.胶体金免疫层析法的建 立.结论:以人cTnI为抗原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术得到五株能稳定分泌抗 人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的细胞株.选择两个识别不同抗原表位的单抗,免疫层析技术及生物素-链酶亲和素放大系统,成功建立了人cTnI免疫层析定性检测试剂盒.用该试剂盒对20份AMI患者及20份正常人血清进行检测,阳性率为85%,无假阳性反应,与美国PBM公司cTnI检测试剂盒的结果进行比较两者有较好的相关性.该研究填补了国内cTnI检测试剂盒的空白,经过进一步的开发和利用可望成为未来国内临床心肌损伤 诊断的重要手段之一,能够产生巨大的社会效益和经济效益.
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