βAmyloid蛋白在恒河猴脑组织中的形态学、分布及量变关系的研究

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本研究旨在观察βamyloid蛋白在不同年龄的恒河猴组织学和细胞超微结构的形态、分布及量变关系。同时用Sandwich ELISA的方法分别测定βamyloid蛋白在脑组织、血浆和脑脊液中的含量并分析其与年龄的相关性。实验用成年恒河猴12只,年轻组5只(5-9岁),成年组3只(10-19岁),老年组6只(>20岁),分别取脑组织额叶、海马、颞叶和顶叶做免疫组化,观察βamyloid蛋白在组织学上的分布特点及与年龄的关系;选用23岁恒河猴一只,灌注后取上述部位做免疫电镜,观察βamyloid蛋白在细胞超微结构水平的分布。同时将脑组织额叶、海马、颞叶和顶叶裂解匀浆后与脑脊液和血浆做ELISA测定βamyloid蛋白的含量。实验结果显示免疫组化染色可观察到年轻猴的神经细胞和胶质细胞中有少量的Aβ40颗粒,以额叶和海马居多。在老年组脑组织中Aβ40常聚集成团状斑块。年轻组神经细胞内未见明显的颗粒状Aβ42,而老年猴额叶的细胞间质有散在Aβ42斑块沉积,神经细胞和胶质细胞内也见有Aβ42颗粒状沉积。免疫电镜可观察到Aβ40胶体金颗粒大部分存在于老年猴神经细胞细胞质中,在细胞间质和小胶质细胞中也可见少量的胶体金颗粒,多见于额叶;标记Aβ42的胶体金颗粒也是多见于神经细胞中,在小胶质细胞中少量存在,同时在颞叶的神经纤维束中也可见Aβ42标记的胶体金颗粒。血浆中Aβ40随着年龄的增加含量有增加趋势,同时三组进行方差分析P<0.05;脑脊液中Aβ40三组没有明显变化;脑组织中只有颞叶部位的Aβ40与年龄有相关的下降趋势,并且三组进行方差分析P<0.05,其余三个部位均为P>0.05。血浆和脑脊液中Aβ42随着年龄的增加含量均有增加趋势,同时三组进行方差分析P<0.05;脑组织中四个部位的Aβ42均与年龄有相关的增加趋势,并且三组进行方差分析均为P<0.05。实验结果表明恒河猴脑组织中存在Aβ40和Aβ42,并且Aβ42有明显的随年龄增加的趋势,其在组织学和亚细胞学水平观察均在额叶和海马部位发现较多沉积,且与定量分析趋势一致。
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