毛蚶三种抗氧化应急类蛋白基因的鉴定及其在苯并芘与镉单一及复合胁迫下的表达

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过氧化氢酶基因(Catalase,CAT)、金属硫蛋白基因(Metallothionein,MT)及热休克蛋白基因(Heat Shock Protein 90,HSP90)是生物体内常见的三种抗氧化应急类免疫基因。CAT是一种存在细胞体内对酶类的清除剂,与脂质和活性氧自由基的代谢有关;MT是一种富含半胱氨酸(Cys)并广泛存在于生物体内的小分子蛋白,有结合金属离子的能力,也有效调节生物体细胞内的金属离子平衡的能力,具有重金属解毒、清除自由基等的功能;HSP90作用于许多靶蛋白,在机体细胞受到温度以及环境因素刺激下大量产生,使细胞内环境保持稳定。毛蚶(Scapharca subcrenata)这个食用类的贝类在我国有被广泛的养殖,其次在其他国家比如说日本,朝鲜等也有被用作食用类贝类,在我国的莱州湾、渤海湾、辽东湾被人们大量养殖,该贝类喜欢生活在浅水区。但令人可惜的是近年来,毛蚶正在遭受由各种环境变化引起的疾病危害,其中包括但不仅限于重金属污染及有机污染物污染,这势必会给毛蚶市场带来严重的破坏。在本研究实验中,首次鉴定了CAT、MT及HSP90基因并对其在毛蚶体内在苯并芘及镉单一及混合胁迫下的免疫应急反应进行了研究,研究结果有助于为毛蚶的养殖技术提供一定的理论基础。具体研究成果如下:获得毛蚶CAT、MT及HSP90基因cDNA的全长,主要包括为,Ss-CAT基因信息:全长2145bp,ORF为1482bp其中,5′-UTR区650bp及3′-UTR区1118bp,Ss-CAT基因可编码493个氨基酸,CAT基因在不同的物种间的不确定性较大但在贝类中展现出了高保守型。Ss-MT基因信息:全长为816bp,ORF为231bp。其中,5′-UTR区158bp,3′-UTR区685bp,Ss-MT基因可编码76个氨基酸,MT基因在不同的物种间的进化可能因为其本身的基因组分展现出了高保守型。Ss-HSP90基因信息:全长为2613bp,ORF为2187bp。其中,5′-UTR区281bp,3′-UTR区1435bp,Ss-HSP90基因可编码728个氨基酸,并对该三个基因做了同源性分析。在胁迫实验中,在镉离子和苯并芘的刺激下,由Q-PCR技术分析结果表明三种免疫基因分别对于镉和苯并芘混合处理与单一处理呈现出了差异性表达。综上研究结果表明,该三种免疫基因均参与了毛蚶在重金属及有机污染物胁迫下的免疫应急反应,可作为毛蚶抗病育种的靶标,同时也为其作为生物环境污染标志物的可能性提供了一定的理论基础,有助于提供毛蚶的繁殖育苗技术性指导。
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