淫羊藿总黄酮和多糖的提取工艺优化及多糖的抗氧化活性评价

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淫羊藿又名仙灵脾,是小檗科(Berberidacea)淫羊藿属(Epimedium)多年生草本植物。全世界约有59种,中国约有48种,是全世界淫羊藿属植物的主要分布区之一。《中国药典》(2010年版)收载巫山淫羊藿(E. wushanense)、箭叶淫羊藿(E. sagittatum)、柔毛淫羊藿(E. pubescenese)、淫羊藿(E. brevicornum)和朝鲜淫羊藿(E. koreanum)5个种为正品。淫羊藿茎叶入药,辛温无毒,作为中国传统补益中药具有坚筋骨、益精气、补腰膝、强心力等作用。现代药理实验证明,其主要活性成分是黄酮类和多糖,具有广阔而显著的药用价值,可治疗多种疾病,尤其是在治疗心脑血管疾病和抗肿瘤方面具有巨大的应用前景,成为现代医学研究的热点。目前淫羊藿属植物的研究多局限于黄酮类成分,且集中于药理药效,有效成分提取的研究相对滞后;研究表明,淫羊藿多糖具有效果优于或作用特点不同于淫羊藿总黄酮的多种生物活性,具有广阔的开发前景和不容忽视的地位。粗毛淫羊藿因含量低未被药典收录,其提取研究长期以来一直较少;但因其植株相对高大,分布广泛,生物量大,在许多地方也被当做药用,有很大的开发价值,本研究以粗毛淫羊藿为对象,优化了一种淫羊藿总黄酮和多糖的分步提取工艺,旨在低耗能前提下提高淫羊藿总黄酮和多糖的提取效率及淫羊藿药材的综合利用率。考察所得多糖对DPPH、02-和·OH的清除作用,评价优化工艺所得多糖的抗氧化活性。主要研究结果如下:1.进行了淫羊藿总黄酮和多糖的分步提取工艺优化,最优工艺为:原材料按料液比1:10加入70%乙醇,在60℃提取温度、150W超声功率下提取2次,每次5min,而后药渣(以干重计)按料液比1:10加入水,在90℃提取温度下提取2次,每次30min。2.对淫羊藿总黄酮和多糖的分步提取工艺进行评价:采用该优化工艺提取总黄酮和多糖,精制纯化后总黄酮的得率为7.64%(淫羊藿苷含量为9.56%),明显高于索氏提取法和微波提取法,略高于原超声提取法,淫羊藿苷含量均差别不大:多糖的得率为3.68%,优于水煎法和微波提取法。3.抗氧化活性试验表明,淫羊藿多糖具有较强的DPPH、O2-清除能力和一定的·OH清除能力。在清除DPPH和·OH方面,本工艺药渣提取多糖的抗氧化能力低于其他方法;在清除O2-方面,超声法提取多糖能力最弱,本工艺药渣提取多糖能力与水煎法、微波法、酶法所得多糖相同。其中微波法和水煎法所提多糖对3种自由基的清除能力方面均相同。4.综合本优化工艺所得多糖得率与抗氧化活性,通过与其他多糖提取方法的比较来进一步评价该工艺:在对DPPH和-OH清除的总效力上,药渣所提多糖均为最小而在对O2-清除的总效力上,优化工艺大于超声法、微波法和水煎法。多糖有部分抗氧化功能损失,但综合考察,从淫羊藿药渣中提取多糖的工艺切实可行,可为淫羊藿有效成分的大规模工业化生产提供理论依据。
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