研究目的在临床应用固本平喘汤防治慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并肺纤维化(PF)并取得良好疗效的基础上,进一步研究该方对COPD合并PF动物模型细胞外基质Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)及层粘连蛋白(LN)含量的影响,探讨固本平喘汤防治COPD合并PF的作用机制,为临床应用提供理论依据。研究方法1.动物和分组：将体重180-200g大鼠60只,雌雄各30只,随机分为正常组对照组、模型组、西药组、固本平喘汤小剂量组、大剂量组,每组12只。2.动物模型制作：将12只大鼠置于特制熏烟箱(60×55×70cm3)内,每9只香烟相接,一端固定于熏箱顶,点燃下端,燃毕换另12只,每日48只,每周7d,连续4周。第5周将除正常组外大鼠以10%水合氯醛(0.36ml/100g)腹腔注射麻醉,颈前剪毛后碘伏常规消毒,行颈正中切口,钝性分离暴露气管,经气管软骨环间隙向心端穿刺一次性注射器注入博莱霉素生理盐水溶液0.2ml(约博莱霉素4mg/kg),立即将动物直立并旋转鼠板,使药液在肺内均匀分布,缝合皮肤,常规消毒,待动物自然苏醒后置笼内常规饲养。造模后第2天开始用药,正常组及模型组均予等体积生理盐水灌胃,2次/日,西药组给予腹腔注射地塞米松0.3mg/100g,1次/日,固本平喘汤(炙麻黄、苦杏仁、甘草、紫苏子、白芥子、莱菔子、黄芩、地龙、淫羊藿、补骨脂、巴戟天、黄芪、丹参、川芎)大、小剂量组分别给予免煎冲剂4m1(根据人与大鼠药物剂量换算公式,设计药物剂量,浓缩成含生药2.7g/ml的免煎冲剂)、1ml(药物浓度同上)灌胃,2次／日,以上各组均给药28天。3.检测方法和观测指标：①一般情况观测大鼠的活动度、对外界反应的灵敏度、皮毛光泽、饮食、饮水、体重、死亡情况。②HA、LN、PCⅢ检测于第8周,经10%的水合氯醛0.36ml/100g腹腔麻醉后,抽取外周血,严格按照试剂盒说明书采用酶联免疫吸附法检测大鼠血浆中HA、LN、PCⅢ水平。③病理切片形态学观察分批处死大鼠后,迅速取出右肺中叶,10%中性福尔马林溶液中固定,乙醇梯度脱水,二甲苯透明标本,浸蜡,包埋,切片,分别行HE染色,观察肺泡炎、肺纤维化程度以及在3个高倍镜下统计支气管黏膜下成纤维细胞、淋巴细胞、巨噬细胞数。4.所有结果采用均数±标准差(x±s)表示,采用SPSS10.0软件进行均数单因素方差分析,P<0.05即认为有统计学意义,P<0.01有显著性差异。研究结果1.正常对照组皮毛光滑,身体健壮,饮食、活动、体质量增长正常。模型对照组皮毛干枯稀疏,精神不振,反应迟钝,进食、活动均减少,剧烈运动后出现喘息症状,体重较造模前略有增加,个别体重下降。西药组开始尚可,后期出现皮毛干枯,活动及饮食均减少。固本平喘汤大小剂量组皮毛尚可,身体较壮,活动及饮食较正常,体重明显增加。2.正常组大鼠肺内结构均正常,细支气管周围炎性细胞浸润不明显,血管壁肌层无增厚,肺泡间隔无水肿、炎症及纤维化表现,肺泡内无明显渗出。模型组可见急性渗出性炎,有浆液性物质渗出,充满肺泡间隔内,部分肺泡结构破坏,肺泡融合,成纤维细胞、淋巴细胞、胶原纤维大量聚集。西药组与中药大、小剂量组病理过程同模型组,但纤维化病变程度及范围均较模型组小(见附图1至5)。3.模型组第8周外周血中PCⅢ、HA及LN含量明显高与同期正常组,P<0.01。西药组、中药小剂量组、中药大剂量组第8周外周血中PCⅢ、HA及LN含量高与同期模型组,均P<0.05。西药组与中药大小剂量组相比无明显差异性,均P>0.05。4.模型组支气管黏膜下成纤维细胞、淋巴细胞、巨噬细胞计数明显高与正常组,P<0.01。西药组支气管黏膜下成纤维细胞、淋巴细胞、巨噬细胞计数明显小与模型组,P<0.01。西药组与中药小剂量组、中药大剂量组相比较无明显差异性,P>0.05。符合COPD慢性气道炎症以及PF进程中成纤维细胞大量增生的病理特点。结论固本平喘汤能有效减轻大鼠肺纤维化,降低肺纤维化大鼠细胞外基质中UA、PCⅢ、LN含量是其作用机制之一。