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目的:肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,在我国的发病率和死亡率很高,且有逐年增长趋势,在发达国家常见恶性肿瘤中,发病率和死亡率居首位。当今在对肺癌的研究中,基本上把肺癌分为小细胞肺癌与非小细胞肺癌两种类型来进行,其中非小细胞肺癌是最常见的类型。尽管全球医学工作者做了很大的努力,肺癌的5年生存率仍在20％左右。如何提高肺癌患者的生存率与生存质量成为了一个亟待解决的问题。最近的研究表明,肺癌细胞中存在Fas/FasL系统的表达异常。相对于癌旁组织,肺癌组织中的Fas表达水平降低,FasL表达水平升高。可能是因为肺癌细胞Fas表达水平低下,逃避了T细胞的杀伤,造成Fas/FasL启动的癌细胞凋亡程序作用减弱,而癌细胞高表达的FasL能结合Fas受体,使T细胞凋亡。因此,肺癌细胞通过低表达的Fas和或高表达的FasL逃避或反击T淋巴细胞的杀伤达到癌细胞的恶性增殖。Fas/FasL的异常表达在肺癌细胞的凋亡、生长、转移和逃避免疫杀伤等方面有着极其重要的作用。当前国内有关于非小细胞肺癌Fas/FasL基因表达情况及其与凋亡关系的研究报道较为罕见,国外也多限于小细胞肺癌细胞系的研究。而Bcl-2作为经典的抗细胞凋亡蛋白基因,已经有很多研究证明其在促进癌症的发展和发生方面有重要作用。因此进一步探讨Fas,FasL和Bcl-2基因蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义就显得很有意义了。
方法:采用流式细胞检测技术对非小细胞肺癌组织进行Fas/FasL和Bcl-2的计量分析。标本取自沧州市中心医院胸外科2009年6月至9月通过手术治疗的部分非小细胞肺癌患者的新鲜癌组织标本,共60例,其中,男性35例,女性25例,年龄45～78岁,平均年龄56岁,根据WHO标准分型分为:鳞癌35例,腺癌25例:高分化肿瘤细胞15例,中分化肿瘤细胞24例,低分化肿瘤细胞21例:淋巴结阳性34例,淋巴结阴性26例;按UICC2009年肺癌PTNM分期标准:Ⅰ期22例,Ⅱ期14例,Ⅲ期20例,Ⅳ期4例。用10例癌旁组织作为对照组织。癌旁组织取于非小细胞肺癌患者残端阴性组织,距癌灶边缘至少5厘米以上。用组织剪剪取新鲜标本约0.5cm×0.5cm×0.5cm大小的组织块1-2块,依次进行过滤、离心、标抗等步骤,用流式细胞仪对标抗好的单细胞悬液组织进行流式分析检测,以PBS液作为阴性对照,只加二抗(FITC)作为阳性对照,检测结果以平均荧光强度(x-mode)表示检测物中蛋白的含量。采用SPSS13.0统计软件进行分析。P＜0.05为差异有统计学意义。
结果:
1 Fas基因蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达比癌旁肺组织相对减弱。在癌旁肺组织中表达阳性率为100%,在非小细胞肺癌组织中的表达阳性率为49.5%,与之相反,FasL在非小细胞肺癌组织中的表达比癌旁肺组织相对增强,癌旁肺组织中的表达率为22.2%,在癌组织中的表达率为65.6%,差异明显。
2 Bcl-2基因蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达比癌旁肺组织相对增强,在癌组织中的表达率为65.5%,在癌旁肺组织中的表达率15.2%。差异明显。
3肿瘤的TNM分期、分化程度及是否有阳性淋巴结转移与Fas、FasL和Bcl-2的表达密切相关(P＜0.05),随着TNM分期变晚,肿瘤分化降低以及淋巴结转移时,FasL和Bcl-2的表达水平增高,Fas表达水平降低。
结论:Fas,FasL,Bcl-2的异常表达关系到非小细胞肺癌的发生发展。