婴幼儿血管瘤survivin基因启动子甲基化的研究

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目的:本研究拟采用亚硫酸氢盐修饰后测序法(BSP)检测survivin基因启动子区域在不同时期血管瘤及正常皮肤组织中的甲基化状态,初步探讨survivin基因甲基化在血管瘤增生与退化中可能作用。方法:(1)采用免疫组化S-P法检测血管瘤石蜡标本增殖期30例、消退期30例、正常包皮皮肤组织标本10例中survivin的表达;(2)提取石蜡包埋块组织基因组DNA并纯化后,采用亚硫酸氢盐修饰后测序法(BSP)分别检测增殖期血管瘤30例、消退期血管瘤30例及正常包皮组织10例中survivin基因启动子CpG岛甲基化情况。结果:(1)survivin蛋白在血管瘤增殖期、消退期和正常包皮组织中阳性表达率分别为76.6%(23/30)、33.3%(10/30)和20%(2/10)。血管瘤增殖期survivin蛋白表达明显高于消退期(2=7.16,P<0.05)。消退期血管瘤survivin蛋白表达与正常包皮组织差异无统计学意义(x~2=3.98,P>0.05);(2)survivin基因启动子CpG岛甲基化状态在血管瘤增殖期、消退期、正常包皮组织间存在明显差异。10例正常包皮皮肤组织中1例(10%)非甲基化,9例(90%)甲基化;30例血管瘤消退期标本中8例(26.6%)非甲基化,22例(73.3%)甲基化;30例血管瘤增殖期标本中24例(80.0%)非甲基化,6例(20%)甲基化;80%的增殖期血管瘤标本survivin基因启动子区域处于去甲基化状态,甲基化率明显低于消退期(x~2=11.53,P<0.05);正常包皮组织survivin基因启动子区域基本处于甲基化状态。(3) survivin蛋白表达阳性的血管瘤33例中31例survivin基因启动子CpG岛为非甲基化,survivin蛋白表达阴性的27例中26例survivin基因启动子CpG岛为甲基化状态。survivin基因的甲基化状态与survivin蛋白表达密切相关。启动子CpG岛的去甲基化和survivin蛋白表达呈正相关(r=0.915,x~2=9.84,P<0.05),而甲基化和survivin蛋白表达呈负相关(r=-0.879,x~2=9.27,P<0.05)。结论:(1)血管瘤增殖期survivin蛋白表达明显高于消退期;(2)survivin基因启动子甲基化状态在血管瘤增殖期、消退期及正常包皮皮肤组织中存在明显差异;(3)在血管瘤组织中survivin基因启动子的甲基化状态与survivin蛋白的表达具有相关性;(4)survivin基因启动子区CpG岛异常甲基化可能在血管瘤的增生与消退过程中起到一定作用。
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