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目的:外泌体(exosomes)是近几年干细胞研究的新突破之一。越来越多的证据表明干细胞植入治疗起主要修复作用的不是干细胞本身,而是其分泌的各种活性物质,exosomes是这些物质中起主导作用的成分。本文主要研究脐带间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,UC-MSCs)来源的exosomes对退变椎间盘髓核干/祖细胞(degenerative intervertebral disc nucleus pulposus stem/progenitor cells,D-NPMSCs)的作用。主要从细胞的增殖能力、多能性和炎症细胞因子等方面评估exosomes的作用,并探讨其作用机制。方法:采用酶消化法和组织块法分别从退变髓核组织和健康新生儿脐带组织中提取D-NPMSCs和UC-MSCs,并扩增培养。使用超高速离心法从收集的UC-MSCs条件培养液提取exosomes,并使用透射电镜,纳米粒子分析系统和免疫印迹的方法对提取的exosomes进行鉴定。将得到的exosomes作用于D-NPMSCs后,流式细胞术检测其MSC特异表面标志抗原;qRT-PCR检测髓核祖细胞标志基因,多能性基因,髓核细胞特异性基因和炎症因子的表达水平;CCK8和流式细胞术检测D-NPMSCs的增殖能力,凋亡和周期,并用免疫印迹法检测增殖相关通路的蛋白表达。结果:UC-MSCs的条件培养液提取物的鉴定结果显示:70%提取物是粒径在30-100nm之间具有膜状结构的囊泡,高表达exosomes阳性标志物CD63和TSG101。用所提取的exosomes作用D-NPMSCs后,结果显示其MSC特异表面抗原,髓核祖细胞标志基因Tie2和多能干性基因SOX2,OCT4和NANOG的表达水平显著上调,而NP细胞特异性标志基因ACAN,COL2A1,CD24和炎症因子IL-1β显著下调,IL-6的表达则显著上调;细胞增殖能力明显提高,且凋亡细胞比例显著减少,细胞增殖相关的通路蛋白表达量明显增加。结论:实验数据表明,人脐带来源间充质干细胞分泌的exosomes可以提高D-NPMSCs的细胞增殖能力和多能性基因的表达,调节炎症因子的表达,从而增强D-NPMSCs再生能力。