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目的慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征（CP/CPPS）是一种常见的泌尿生殖系统疾病。CP/CPPS最常见的临床表现为长期的慢性盆腔疼痛,伴或不伴有排尿症状。除此之外,很多CP/CPPS患者还表现出抑郁、焦虑、记忆能力下降等神经精神症状。多个临床研究也证实CP/CPPS可引起患者出现情绪异常和学习记忆损害,但其背后的机制仍不清楚。近年来,越来越多的研究表明肠道菌群失调、胶质细胞激活与情绪异常密切相关,同时神经突触结构的可塑性改变在学习记忆中起着重要作用。因此,本研究拟建立实验性自身免疫性前列腺炎（EAP）?小鼠模型,探讨肠道菌群在EAP诱导的抑郁行为中的作用。同时,进一步研究EAP对小鼠情绪行为和学习记忆影响的神经机制。方法雄性NOD小鼠两次皮下两次注射前列腺抗原和免疫佐剂。通过旷场试验（OFT）、糖水偏好实验（SPT）、高架十字迷宫实验（EPM）、强迫游泳试验（FST）和悬尾试验（TST）评估小鼠的情绪行为。利用Morris水迷宫（MWM）和新奇物识别实验（NORT）检测小鼠的学习记忆能力。收集小鼠粪便样本进行16S r RNA测序,比较对照组和EAP组小鼠肠道菌群组成的差异。并将该两组小鼠的粪便移植到抗生素处理的假无菌小鼠体内,观察其对受体小鼠的情绪行为和肠道菌群组成的影响。运用免疫荧光、蛋白印迹和透射电镜等方法检测对照组和EAP组小鼠海马小胶质细胞和星型胶质细胞的形态与功能。进一步利用RT-PCR检测TNF-α、IL-1β等促炎因子水平以及五羟色胺（5-HT）的转运体SLC6A4和合成限速酶IDO的含量,并用ELISA法测定血清5-HT浓度。同时,采用氢质子磁共振波谱（1H-MRS）测定海马谷氨酸水平。此外,利用高尔基染色分析小鼠海马锥体神经元树突复杂性和树突棘密度。通过透射电镜观察突触的超微结构。并运用免疫荧光分析小胶质细胞的活化状态及其与突触之间的关系。结果1、（1）EAP模型的建立:（1）小鼠体重:对照组和EAP组小鼠体重无明显差异。（2）前列腺HE染色:对照组前列腺无明显炎症,EAP组炎症细胞浸润明显。（3）前列腺炎病理评分:EAP组平均炎症评分较对照组明显增高（P<0.001）。（4）盆腔疼痛测量:EAP组小鼠对盆腔刺激的响应频率变化百分比显著增加。（2）情绪相关行为学:（1）OFT:EAP组的中央区距离（P<0.05）、中央区时间（P<0.05）和站立次数（P<0.05）均较对照组明显减少。（2）SPT:EAP组糖水偏好百分比明显下降（P<0.05）。（3）EPM:EAP小鼠的开臂时间（P<0.05）、开臂时间百分比（P<0.05）和进入开臂次数均显著减少（P<0.01）。（4）FST和TST:EAP小鼠的不动时间明显延长（P<0.05）。（3）对照组和EAP组肠道菌群组成分析:（1）α-多样性:EAP组Chao 1指数（P<0.05）、Shannon指数（P<0.01）、Simpson指数（P<0.01）和PD whole tree指数（P<0.05）均增加。（2）β-多样性:NMDS和PCA分析显示EAP组的β-多样性与对照组明显不同。（3）门、纲、目、科、属、种六个层面上两组小鼠多个肠道菌群的相对丰度不同。（4）粪便移植后受体小鼠行为学:（1）抗生素处理的受体小鼠较未处理组小鼠在FST（P<0.01）和TST（P<0.05）中的不动时间更长,且OFT中的中央区时间（P<0.05）和站立次数（P<0.01）减少。（2）接受对照组小鼠粪便移植对受体小鼠的抑郁行为具有改善作用,接受EAP组小鼠粪便移植则加重抑郁表现。（5）粪便移植后受体小鼠肠道菌群组成分析:（1）接受对照小鼠粪便移植和接受EAP小鼠粪便移植的受体小鼠在α-多样性和β-多样性上存在明显差异。（2）不同组小鼠肠道菌群在门、纲、目等六个层面上共有24种细菌丰度发生变化。2、（1）海马胶质细胞形态与功能:（1）免疫荧光:EAP组海马Iba1标记的小胶质细胞激活增多（P<0.05）,GFAP标记的星形胶质细胞阳性染色面积增加（P<0.05）。（2）蛋白印迹:EAP组Iba1（P<0.05）和GFAP（P<0.01）的蛋白水平明显增高。（3）透射电镜:EAP组海马小胶质细胞的胞质中溶酶体明显增多、变大,星形胶质细胞的胞质中细胞器数量增多。（2）促炎因子检测:EAP组海马TNF-α（P<0.01）、IL-1β（P<0.05）、IL-6（P<0.01）、IL-8（P<0.05）的m RNA表达水平显著高于对照组。（3）神经递质系统变化:（1）5-HT能系统:EAP小鼠海马中SLC6A4（P<0.05）和IDO（P<0.05）的m RNA表达增高,血清5-HT浓度降低（P<0.05）。EAP小鼠血清5-HT浓度与OFT中的中央区时间（r=+0.692;P=0.027）和EPM中的开臂时间（r=+0.657;P=0.039）呈正相关,与FST（r=-0.733;P=0.016）和TST（r=-0.755;P=0.012）中的不动时间呈负相关。（2）谷氨酸能系统:1H-MRS显示EAP小鼠海马谷氨酸+谷氨酰胺（Glx）/总肌酸（t Cr）比率显著降低（P<0.05）。3、（1）记忆相关行为学:（1）MWM:定向航行试验中,EAP小鼠在第4、5两天的逃避潜伏期显著缩短（P<0.05）。空间探索试验中,EAP组的目标象限时间（P<0.01）和穿越平台次数（P<0.05）明显减少。（2）NORT:EAP组的识别指数显著降低（P<0.01）。（2）Sholl分析海马神经元树突复杂性:EAP组树突分支与同心环的交点数（60-90μm处P<0.05）、树突的分支数（P<0.05）和总长度（P<0.01）明显降低。（3）树突棘密度及突触蛋白分析:EAP组中尖部（P<0.05）和根部（P<0.01）树突的树突棘密度显著降低,突触相关蛋白SYN（P<0.01）和PSD95（P<0.05）表达减少。（4）突触超微结构体视学分析:EAP海马CA1区突触后致密物厚度降低（P<0.01）、突触间隙增宽（P<0.001）、突触曲率降低（P<0.01）。（5）小胶质细胞活化状态分析:（1）EAP组海马中部分（P<0.05）和完全（P<0.05）变形虫样小胶质细胞的数量显著增加。（2）EAP组海马小胶质细胞表面标记物CD11b蛋白含量显著增加（P<0.05）。（6）小胶质细胞与突触关系:（1）EAP组中与小胶质细胞相接触的神经元比例增大（P<0.05）。（2）EAP组小胶质细胞与突触之间联系增加（P<0.001）。结论1、EAP中肠道菌群失调有助于诱导小鼠出现抑郁样行为。2、EAP引起的小鼠情绪改变可能与海马胶质细胞活化及其介导的5-HT和谷氨酸递质系统异常有关。3、EAP引起小鼠学习记忆能力下降和神经突触结构可塑性改变,并伴有小胶质细胞和突触的联系增加。