华北大黑鳃金龟（Holotrichia oblita）属于鞘翅目金龟甲总科（Scarabaeoidae）,其幼虫对农、林、牧草等都有为害,在我分布广泛,种群数量大,危害严重。苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）是革兰氏阳性细菌（G⁺）,在其生活史中能产生多种杀虫晶体蛋白,是目前应用最为广泛而有效的一种生物杀虫剂。本研究从全国各地的土样中筛选得到含cry8类基因的野生型菌株GW11,该菌株对华北大黑鳃金龟具有杀虫活性,LC₅₀为6.43×10⁶cell/mL。Cry8Ea2蛋白是一种新型苏云金杆菌杀虫晶体蛋白。本研究通过穿梭载体pSXY422b将cry8Ea2导入Bt无晶体突变菌株HD73^-（cry^-）中,获得工程菌HD8Ea2。Cry8Ea2蛋白在工程菌中获得表达。通过分子筛层析,成功获得纯化的130kDa活性毒蛋白。用改进的生物活性测定方法进行Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟一龄幼虫的杀虫活性测定,LC₅₀为0.2679μg/mL。本研究应用16S rDNA PCR-RFLP方法,对正常生长的华北大黑鳃金龟二龄幼虫和饲喂Cry8Ea2蛋白的二龄幼虫中肠微生物进行了研究。从正常生长和饲喂Cry8Ea2蛋白的二龄幼虫中分别得到300个含有16S rDNA的克隆,分别随机挑选24个克隆进行PCR-RFLP的鉴定,结果发现:源自正常二龄幼虫的的24个克隆呈现17种不同带型;源自饲喂Cry8Ea2蛋白的二龄幼虫的24个阳性克隆呈现5种不同带型。