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Dna J蛋白是热休克蛋白(Hear Shock Proteins)家族中HSP40亚家族成员,编码的蛋白质序列N-端有典型的J domain保守结构域。在植物中常作为分子伴侣参与生物体的各种代谢途径,在植物的生长发育、代谢调控及逆境胁迫等方面都起着重要的作用。Dna J蛋白在植物体中作用机制的研究,扩充了HSPs家族的功能,同时也对植物抗逆性新品种的选育有重大的意义。本研究对烟草中编码HSPs蛋白的Nt Dna J1基因进行了初步的基因序列和功能分析,主要研究内容如下:1对生产中常用的15个烟草品种进行抗旱性材料筛选,筛选出了抗旱性较好的龙江851、NC89等。取抗旱性差异较大的烟草品种(龙江851和金星6007)做基因芯片,进行表达水平的差异分析。通过对龙江851芯片结果分析,我们锁定了编码热休克蛋白的基因Dna J,命名为Nt Dna J1。2从烟草品种(龙江851)中克隆了基因Nt Dna J1。该基因全长1257bp,氨基酸序列的N-端有70个氨基酸组成的保守结构域(J domain)。3通过Real-time PCR的方法,分析了Nt Dna J1在植株不同组织的特异性表达情况和在抗旱性不同的15个烟草品种中的特异性表达情况。结果显示,Nt Dna J1主要在叶和花中表达;与此同时,Nt Dna J1受干旱的诱导,在抗旱性较好的品种中有较高的表达。4在自然干旱、PEG及盐胁迫处理后发现,at Dna J突变体较野生型拟南芥对胁迫条件有较大的敏感性,这也初步证明了Dna J基因在抗旱性方面的作用。5构建了植物过量表达载体p27-Nt Dna J1,进行Nt Dna J1在拟南芥中的过表达,研究发现,在胁迫条件下转基因系比野生型及at Dna J突变体有较好的抗逆性。通过以上的研究,可以初步认定Nt Dna J1在植物抗旱性方面有重要的作用,但在分子和蛋白水平上还需要更多的研究来揭示它的作用机制,为植物逆境胁迫的研究提供理论基础。