目的:(1)基于软骨下异常骨吸收探究青蒿琥酯对小鼠骨关节炎疼痛的调控机制;(2)基于JAK/STAT通路探究青蒿琥酯对人骨关节炎软骨细胞炎症反应的作用机制。方法:(1)将3月龄雄性C57BL小鼠随机分为三组,即假手术组、安慰剂组和青蒿琥酯组。术后14天,通过足印迹实验评估小鼠行为学改变;通过ELISA和TRAP染色评估外周血TRAcP5b、cathepsin K和CTX-I表达水平以及软骨下骨吸收程度;通过免疫染色评估软骨下骨中神经轴突导向分子(netrin-1)和感觉神经末梢(CGRP)增生程度。通过番红固绿染色和骨关节炎软骨评分评估关节软骨退变程度;术后30天,通过免疫染色评估关节软骨中促炎细胞因子(TNF-α、IL-6、COX-2)表达情况。(2)人软骨细胞来源于膝关节置换术中截取的胫骨平台外侧关节软骨。本研究设立五组,即对照组、IL-1β组和IL-1β+不同浓度青蒿琥酯组。通过CCK-8检测青蒿琥酯对IL-1β干预的软骨细胞活性影响。通过ELISA、qRT-PCR、Western blotting检测青蒿琥酯对软骨细胞炎症反应(TNF-α、IL-6、COX-2)的影响。Western blotting评估青蒿琥酯对JAK/STAT通路的作用机制。结果:(1)足印迹结果表明,青蒿琥酯能有效改善患侧肢体的负重与步态。TRAP染色显示青蒿琥酯显著减少软骨下骨异常增多的破骨细胞。免疫染色表明青蒿琥酯有效减少软骨下骨中netrin-1表达及CGRP+感觉神经。番红固绿染色和软骨评分表明青蒿琥酯有效延缓关节软骨退变。免疫染色显示青蒿琥酯显著抑制关节软骨炎症因子(TNF-α、IL-6、COX-2)的高表达。(2)25μM及以下浓度的青蒿琥酯显著改善IL-1β刺激的软骨细胞活性。IL-1β上调软骨细胞炎症反应因子(TNF-α、IL-6、COX-2)的表达,25μM及以下浓度的青蒿琥酯显著抑制炎性因子的异常高表达。青蒿琥酯剂量依赖性地抑制STAT3的磷酸化。结论:(1)青蒿琥酯通过抑制软骨下异常骨吸收减少感觉神经的异常增生,进而改善骨关节炎疼痛,同时延缓关节软骨退变;(2)青蒿琥酯通过使JAK/STAT通路失活抑制软骨细胞的炎症反应。