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目的:结肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,结肠癌的发病原因包括多种突变基因的累积,非编码RNA包括microRNA(miRNA)的失调改变等。已有研究发现C14orf28与精神性疾病相关,本实验室前期研究中发现其表达受到miRNA调控。本研究旨在探讨C14orf28在人结肠癌细胞中的表达情况及miRNA对其表达调控作用,同时阐明C14orf28对结肠癌细胞的恶性行为的调节作用,为进一步研究结肠癌发生的分子机制提供了新的基础。方法:首先探究了C14orf28在结肠癌中的表达水平,通过RT-qPCR检测了20对结肠癌组织中C14orf28的mRNA表达水平,结果表明C14orf28在结肠癌组织中高表达。首先构建了C14orf28的过表达和敲降质粒,在验证了质粒的有效性之后,通过MTT实验检测了C14orf28对结肠癌细胞活性,集落形成实验检测了C14orf28对结肠癌细胞增殖能力的影响,并利用流式细胞术检测C14orf28对结肠癌细胞凋亡能力的影响。Transwell迁移和Transwell侵袭实验检测了C14orf28对结肠癌细胞迁移及侵袭能力的影响。然后利用生物信息学预测软件检测了能够靶定C14orf28的miRNAs,结合miRNAs的已知功能,选择miR-519d作为研究对象。为了验证C14orf28能够被miR-519d直接靶定,构建了含miR-519d结合位点的C14orf28 3’UTR的EGFP荧光报告载体以及将结合位点突变的C14orf28 3’UTR mut EGFP荧光报告载体。通过荧光报告载体实验证明C14orf28能够被miR-519d直接靶定并下调表达,进一步通过RT-qPCR和western blot在mRNA和蛋白水平证实二者有直接的靶定关系。同样利用RT-qPCR在20对结肠癌组织中检测了miR-519d的mRNA表达水平,并对miR-519d与C14orf28进行了相关性分析。并利用实验室前期构建好的miR-519d的过表达质粒,通过MTT,集落形成实验,凋亡实验,Transwell迁移和Transwell侵袭实验检测miR-519d对结肠癌细胞恶性行为的影响。最后,通过挽救实验证明C14orf28与miR-519d之间的靶定关系。结果:C14orf28在结肠癌组织中高表达。在结肠癌细胞系THC-8307,HCT116中C14orf28能够促进结肠癌细胞的恶性行为。利用生物信息学软件以及细胞生物学实验证明miR-519d能够靶定并下调C14orf28的表达。miR-519d在结肠癌组织中表达下调,并抑制结肠癌细胞的恶性行为。挽救实验进一步证实了C14orf28可以被miR-519d靶定来发挥作用。结论:本文发现在结肠癌细胞系中,下调表达的miR-519d靶定并抑制C14orf28表达,进而抑制结肠癌细胞的恶性行为,并诱导细胞的凋亡。这为研究结肠癌发生的分子机制提供了新的思路。