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研究背景：膀胱癌的发生在恶性泌尿系肿瘤中较为多见，其高转移率、高复发率一直是人们关注的焦点。c-Kit是Ⅲ型酪氨酸激酶受体家族的重要成员，在多种细胞中都有表达，其与配体干细胞因子（SCF）结合，参与调控细胞的增殖、存活、分化和迁移等过程。最近的研究发现，SCF/c-Kit信号在胰腺癌、大肠癌和人类黑色素瘤等多种肿瘤的侵袭转移方面具有重要作用，但具体的作用机制及其是否同样在膀胱癌的侵袭转移中发挥作用的研究报道却很少。文献显示，β-连环蛋白（β-catenin）信号通路与多种肿瘤的发生、发展及侵袭转移息息相关，其中β-catenin的胞核内转移是该信号经典转导通路激活的标志。最近的研究报道表明β-catenin信号也参与了膀胱癌的侵袭转移。因此探讨SCF/c-Kit信号在膀胱癌细胞侵袭迁移方面具有什么样的作用及其与β-catenin信号之间有什么样的关系，对全面了解膀胱癌浸润、转移的机制具有重要意义。目的：探讨SCF/c-Kit信号对膀胱癌T24细胞侵袭迁移的影响及其相关机制。方法：1.采用Western blot和流式细胞术（FCM）检测T24细胞c-Kit的表达。2.通过细胞迁移实验（划痕实验）观察T24细胞在经过SCF（1ng/mL）刺激24h后，其迁移能力的变化。3.收集经过SCF（1ng/mL）单独刺激24h，或分别使用c-kit抑制剂Imatinib（100nM）、PI3K-Akt信号通路特异性抑制剂Wortmannin（1μM）、MAPK激酶MEK的高效选择性抑制剂U0126（10μM）、STAT3通路特异性抑制剂JSI-124（5μM）和β-catenin信号抑制剂XAV-939（10nM）预处理40min，再用SCF（1ng/mL）刺激24h后的T24细胞，进行Transwell侵袭实验（直接与间接计数法），观察T24细胞侵袭性的变化。4. Western blot检测T24细胞在SCF（1ng/mL）单独刺激或先使用PI3K-Akt信号通路特异性抑制剂Wortmannin（1μM）预处理40min，再用SCF（1ng/mL）刺激后Akt磷酸化情况。5.采用免疫荧光化学技术，运用激光共聚焦显微镜观察T24细胞经过SCF（1ng/mL）刺激不同时间后， β-catenin在细胞中的定位及其动态变化。6. Western blot检测T24细胞在使用GSK-3β抑制剂Staurosporine (5nM)或LiCl (10mM)处理24h后，β-catenin总蛋白和胞浆蛋白的表达情况，以明确T24细胞中是否存在GSK-3β对β-catenin的调节作用。结果：1. T24细胞中存在c-Kit的表达，其中12%的T24细胞表面存在c-Kit受体的表达。2. T24细胞经SCF（1ng/mL）作用24h后，迁移能力（75.42%）与对照组相比（38.99%）明显提高（P＜0.01）。3. Transwell侵袭实验（直接与间接计数法）的结果表明：与对照组（细胞数和OD值：26.25±0.96，0.096±0.004）相比，SCF单刺激组（细胞数和OD值：47.25±1.71，0.119±0.006）细胞侵袭能力明显提高（P＜0.01）；Imatinib（100nM）+SCF（1ng/mL）组（细胞数和OD值：26.75±0.96，0.091±0.012）、Wortmannin（1μM）+SCF（1ng/mL）组（26±2.16，0.096±0.004）和XAV-939（10nM）+SCF（1ng/mL）组（细胞数和OD值：26±0.82，0.103±0.002）与SCF单刺激组相比侵袭能力则明显降低（P＜0.01）；而U0126（10μM）+SCF（1ng/mL）组（细胞数和OD值：46.75±2.63，0.115±0.002）和JSI-124（5μM）+SCF（1ng/mL）组（细胞数和OD值：47.75±2.99，0.114±0.004）的细胞侵袭能力与SCF单刺激组相比并无明显差异（P＞0.05）。4. T24细胞经SCF（1ng/mL）刺激后，与对照组相比出现了明显的磷酸化Akt条带(P<0.01)，而使用特异性抑制剂Wortmannin（1μM）预处理40min后再用SCF（1ng/mL）刺激的T24细胞磷酸化Akt条带与SCF单刺激组相比明显减弱(P<0.01)。5.与对照组相比，T24细胞受SCF（1ng/mL）刺激不同时间后，β-catenin在细胞内的分布情况有所不同：对照组（SCF刺激0h时），T24细胞膜表面均匀分布细小颗粒状绿色荧光；SCF刺激30min后，可见颗粒状绿色荧光呈弥漫性分布于胞浆内；SCF刺激1h后，可见胞核内的绿色点状荧光明显增多，说明随着SCF刺激时间的变化，细胞内的β-catenin有从胞浆内向胞核内转移的趋势。6.运用GSK-3β抑制剂Staurosporine (5nM)、LiCl (10mM)处理T24细胞后，细胞内的β-catenin总蛋白及胞浆蛋白的表达量均明显上调(P＜0.01)。结论：1. SCF/c-Kit信号通过启动下游的PI3K-Akt途径促进T24细胞的侵袭迁移；2. SCF也可以通过激活β-catenin信号加快T24细胞的侵袭；3. SCF通过PI3K-Akt信号负性调节T24细胞GSK-3β活性；4. T24细胞中GSK-3β具有负向调节β-catenin信号的特点，因此SCF/c-Kit信号可能通过PI3K-Akt-GSK-3β-β-catenin通路促进T24细胞的侵袭迁移。